阿侖膦酸鈉對大鼠主動脈鈣化血管組織骨橋蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)在用維生素D3和華法林制備的實(shí)驗(yàn)性大鼠主動脈鈣化模型上，觀察阿侖膦酸鈉對血管平滑肌細(xì)胞骨橋蛋白表達(dá)的影響，并初步探討其抑制動脈鈣化的可能機(jī)制。
　　 方法：60只5周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組、鈣化組和阿侖膦酸鈉（Alendronate AL）干預(yù)組。正常對照組20只、鈣化組20只、AL干預(yù)組20只。AL干預(yù)組皮下注射阿侖膦酸鈉 1mg/kg/d，持續(xù)至第8天，從第5天起，皮下注射華法林15mg/100g/12

2、h，共4天，維生素D3 300000U/kg/d，共3天。鈣化組從第5天起，皮下注射華法林15mg/100g/12h，共4天，維生素D3 300000U/kg/d，共3天。正常對照組從第5天起，皮下注射等量生理鹽水。然后解剖大鼠主動脈。用Von kossa染色觀察主動脈鈣化情況，RT-PCR檢測OPN mRNA的表達(dá)，免疫組化SABC法檢測各組大鼠主動脈OPN蛋白表達(dá)，用原子分光光度計(jì)檢測主動脈Ca2+含量。
　　 結(jié)果：正常對

3、照組主動脈中膜Von Kossa染色未見黑色深染結(jié)構(gòu)，鈣化組可見主動脈中膜黑色或褐色深染結(jié)構(gòu)，AL干預(yù)組大鼠主動脈黑色或褐色深染結(jié)構(gòu)明顯減少。OPN mRNA的表達(dá)結(jié)果示：鈣化組主動脈內(nèi)OPN mRNA表達(dá)較正常對照組明顯減少(0.0681±0.019 vs 0.2506±0.014，p＜0.05)，AL干預(yù)后主動脈OPN mRN的表達(dá)較鈣化組顯著增加(0.2173±0.012 vs 0.0681±0.019，p＜0.05)。免疫組化S

4、ABC法結(jié)果顯示：鈣化組OPN蛋白的表達(dá)較正常對照組主動脈明顯的降低（0.3188±0.026 vs 0.7523±0.074，p＜0.05)，AL干預(yù)組主動脈內(nèi)OPN蛋白表達(dá)較鈣化組明顯增加(0.5751±0.022 vs 0.3188±0.026,p＜0.05)。主動脈鈣離子含量測定示：鈣化組鈣離子的含量顯著高于正常對照組(1.4131±0.021 vs 0.6197±0.094,p＜0.05)，AL干預(yù)組主動脈鈣離子含量顯著低于鈣