骨橋蛋白在血管平滑肌細(xì)胞中表達(dá)與腹主動(dòng)脈瘤發(fā)生的相關(guān)性.pdf

1、背景：骨橋蛋白是（osteopontin；OPN）一種由多種細(xì)胞分泌的磷酸化糖蛋白，在正常的動(dòng)脈壁中幾乎不表達(dá)，它是細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix；ECM）中一種重要的功能性蛋白和促炎因子，可調(diào)節(jié)血管平滑肌細(xì)胞(Vascular smooth muscle cells；VSMC)的增殖、遷移，并參與VSMC表型轉(zhuǎn)變。近年研究發(fā)現(xiàn)，VSMC是腹主動(dòng)中膜的主要組成成份，其數(shù)目減少、表型轉(zhuǎn)變和細(xì)胞外基質(zhì)的改變是形成腹主動(dòng)

2、脈瘤（abdominal aortic aneurysm；AAA）的重要因素。OPN可促進(jìn)VSMC的凋亡，進(jìn)而引起動(dòng)脈壁結(jié)構(gòu)改變，而AAA組織中VSMC凋亡也十分明顯；同時(shí)有文獻(xiàn)證實(shí)骨橋蛋白在人AAA中高表達(dá)，本課題組前期研究也發(fā)現(xiàn)OPN無論是在人AAA還是在大鼠AAA模型中均有高表達(dá)。然而，OPN在平滑肌細(xì)胞中是否表達(dá)、是否起作用、是否參與AAA的形成及其中涉及的分子機(jī)制尚不明確？因此本研究主要探討醛固酮（Aldosterone；Al

3、d）及血管緊張素II(AngiotensinⅡ；AngII）誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞中骨橋蛋白表達(dá)是否參與到AAA的形成？
　　目的：研究VSMC是否分泌并表達(dá)OPN；Ald和AngII對(duì)OPN表達(dá)及其涉及的信號(hào)通路中各因子表達(dá)的影響；初步驗(yàn)證OPN在VSMC中是否表達(dá)、是否起作用、是否參與AAA的形成？
　　方法：培養(yǎng)大鼠腹主動(dòng)脈VSMC，用免疫印跡（Western blot）法檢測OPN、p-P38、p-ERK等表達(dá)量；用免疫

4、組化法檢測VSMC中OPN和炎癥介質(zhì)MMP-2、MMP-9的表達(dá)情況；用細(xì)胞計(jì)數(shù)法和MTT試劑盒檢測藥物對(duì)VSMC增殖的影響。
　　結(jié)果：（1）VSMC分泌并表達(dá)低水平的OPN；（2）MTT和細(xì)胞計(jì)數(shù)均顯示：Ald、AngII可促進(jìn)VSMC細(xì)胞的增殖。（3）Ald和AngII均可刺激VSMC中ERKl/2、P38發(fā)生磷酸化，引起p-ERK、p-P38表達(dá)增加；MAPKK特異性抑制劑PD98059、p38 MAPK特異性抑制劑SB2

5、03580，可以抑制Ald、AngII誘導(dǎo)的OPN，MMPs表達(dá)及分泌。（3）免疫組化結(jié)果示：Ald、AngII可誘導(dǎo)VSMC中OPN高表達(dá)，同時(shí)上調(diào)MMP-2，MMP-9的表達(dá)及分泌,同時(shí)PD98059和SB203580可降低Ald、AngII的誘導(dǎo)作用。
　　結(jié)論：（1）VSMC表達(dá)并分泌低水平的0PN。（2）Ald、AngII可促進(jìn)VSMC的增殖。（3）ERK和p38 MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路系統(tǒng)參與Ald、AngII誘導(dǎo)OPN