纈沙坦和氟伐他汀對糖尿病心肌病結(jié)締組織生長因子基因表達的影響.pdf

1、近年來糖尿病心肌病(DCM)逐漸受到重視，臨床和動物實驗已經(jīng)證實其明確存在，認為它是與大血管及冠狀動脈病變無關(guān)的心肌病變，與糖尿病患者高心力衰竭發(fā)病率和死亡率密切相關(guān)。臨床研究表明，糖尿病心肌病通常以左心室肥厚和舒張功能減退為早期表現(xiàn)[1，2]，Poirier等[3]發(fā)現(xiàn)血糖控制良好、沒有明顯慢性并發(fā)癥的2型糖尿病患者60％存在左室舒張功能缺陷。臨床約有10％～30％的糖尿病患者發(fā)生心衰。DCM主要病理改變包括心肌細胞增生、肥大，細胞外

2、基質(zhì)(ECM)積聚、纖維化[4]。DCM發(fā)病機制迄今尚未完全闡明，目前研究表明，促進心肌纖維化的炎性、細胞因子異常表達參與其發(fā)病，影響心肌細胞舒縮性和心肌間質(zhì)重構(gòu)。具體的情況及其分子機制仍不明確，有待深入研究。
　　 目的：建立STZ誘導(dǎo)糖尿病大鼠動物模型，觀察糖尿病心肌組織中結(jié)締組織生長因子(CTGF)表達異常對心肌間質(zhì)纖維化、左室肥厚及心功能的影響；同時探討纈沙坦、氟伐他汀及兩藥聯(lián)合應(yīng)用對糖尿病心肌病的保護作用及可能機制，為

3、臨床用藥提供實驗依據(jù)。
　　 方法：雄性SD大鼠尾靜脈注射STZ致糖尿病模型，成模后隨機分為：糖尿病模型組(DM)、纈沙坦組(30mg·kg-1·d-1)、氟伐他汀組(4mg·kg-1·d-1)、纈沙坦聯(lián)合氟伐他汀組及正常對照組共5組，每組8只。干預(yù)治療12周后采血測空腹血糖、血脂、糖化血紅蛋白。用導(dǎo)管法測定血流動力學(xué)參數(shù)：左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)、左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dt max)和下降速率

4、(-dp/dtmax)。血流動力學(xué)監(jiān)測完畢后，從主動脈根部水平離斷心臟，用冷生理鹽水充分沖洗后，濾紙吸干，稱重。計算心臟相對重量百分比(全心重/體重*100％)。對各組進行HE、PAS、Van-Gieson染色。觀察糖尿病大鼠心臟組織的病理改變。利用Van-Gieson染色，圖像分析左室心肌膠原含量；半定量RT-PCR方法檢測大鼠心肌組織結(jié)締組織生長因子(CTGF)基因表達情況；應(yīng)用Western blot技術(shù)檢測心肌組織Ⅰ型膠原蛋白、

5、Ⅲ型膠原蛋白、轉(zhuǎn)化生長因子-β1、CTGF蛋白表達的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1、各組大鼠一般狀況和體重、心/體比率及生化指標(biāo)的變化：糖尿病SD大鼠表現(xiàn)為明顯代謝紊亂，體重明顯低于正常對照組，心/體比率明顯增加37％(P<0.01)。治療后，纈沙坦組心/體比率下降10％，氟伐他汀組下降8％，聯(lián)合治療組效果更佳，下降13％( P<0.01)；糖尿病大鼠空腹血糖和糖化血紅蛋白( HbAlc)水平明顯高于正常對照組，但各個治

6、療組無統(tǒng)計學(xué)差別。糖尿病組大鼠血TG、TC、LDL-C均較正常對照組明顯升高(P<0.01)。與糖尿病組比較，氟伐他汀組和聯(lián)合治療組TC、LDL-C均有下降，有顯著性差異(P<0.01)。
　　 2、與正常對照組比較，DM組血流動力學(xué)指標(biāo)LVSP、±dp/dt max均降低，LVEDP明顯升高(p<0.05)；三個治療組血流動力學(xué)指標(biāo)較DM組均有改善(P<0.05)；聯(lián)合治療組LVSP、±dp/dt max明顯升高，優(yōu)于單藥治療

7、組(P<0.05)。
　　 3、 VG染色圖像分析膠原纖維陽性面積測定的結(jié)果顯示：糖尿病組大鼠心肌組織膠原纖維染成紅色，心肌細胞間充滿大量膠原纖維，分布散亂相互連成網(wǎng)狀，血管周圍聚集較多，與正常對照組相比，膠原纖維陽性面積明顯增加，為正常對照組的2.1倍(P<0.05)。兩單藥治療組心肌組織膠原纖維面積均有所降低(P<0.05)，但仍高于正常對照組(P<0.05)，聯(lián)合治療組心肌膠原纖維面積明顯降低，與正常組無統(tǒng)計學(xué)意義。

8、>　　 4、干預(yù)治療對糖尿病大鼠心肌CTGFmRNA表達的影響：與正常組比較，糖尿病組大鼠心肌CTGFmRNA表達增加，為正常對照組的1.7倍(P<0.05)，氟伐他汀和纈沙坦治療組CTGFmRNA表達分別下降20％，28％(P<0.05)，聯(lián)合治療組下降35％(P<0.05)。
　　 5、 Westem blot印跡檢測結(jié)果：糖尿病組大鼠心肌組織TGF-β1、CTGF蛋白表達較正常對照組明顯增加，作為ECM的主要成分膠原蛋白

9、I和膠原蛋白III表達明顯增加(P<0.01)；各個治療組膠原蛋白表達均有所下降(P<0.05)，聯(lián)合治療組優(yōu)于單獨治療組。
　　 結(jié)論：
　　 1、 CTGFmRNA和TGF-β1過度表達，參與了糖尿病大鼠心肌纖維化的過程，導(dǎo)致左室舒張功能的異常。
　　 2、纈沙坦和氟伐他汀均能夠抑制CTGF及TGF-β1的表達，使得Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原合成明顯減少，抑制心肌纖維化，從而改善心功能。兩藥聯(lián)合治療對糖尿病心肌組織起