依那普利聯(lián)合霉酚酸酯對大鼠糖尿病腎組織結(jié)締組織生長因子表達(dá)的影響.pdf

1、背景與目的：在很多發(fā)達(dá)國家和發(fā)展中國家中，糖尿病腎病(diabeticnephropathy，DN)是糖尿病 (diabetes mellius，DM)主要慢性并發(fā)癥之一，也是導(dǎo)致終末期腎衰竭的主要病因之一。糖尿病。腎病的發(fā)病機(jī)制包括：腎素血管緊張素系統(tǒng) (renin-angiotensin system，RAS)的異常激活，糖基化終末產(chǎn)物(advarreed glycation end-products，AGEs)的積聚，多元醇通路的

2、激活，氧化應(yīng)激以及脂代謝異常。這種多途徑最終通過啟動(dòng)腎組織各種生長因子、炎癥介質(zhì)、細(xì)胞介質(zhì)、血管活性物質(zhì)等產(chǎn)生致腎臟損害。目前認(rèn)為，轉(zhuǎn)化生長因子 B (transforming growth factor-B，TGF-B)是已知的在糖尿病腎病中致硬化作用最強(qiáng)的細(xì)胞因子，而結(jié)締組織生長因子 (connective tissue growthfactor，CTGF)在糖尿病腎病的發(fā)病過程中，作為TGF-B下游調(diào)節(jié)因子，介導(dǎo)TGF-B的作用。

3、糖尿病腎病曾被普遍認(rèn)為是一種非免疫性疾病，然而，近年研究表明，在糖尿病腎病患者和糖尿病動(dòng)物模型的腎臟中發(fā)現(xiàn)有大量巨噬細(xì)胞浸潤，細(xì)胞間黏附分子和趨化因子的過度表達(dá)。提示，炎癥參與DM進(jìn)展。在糖尿病大鼠模型中，應(yīng)用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(angiotensin corlverting enzymeinhibitor，ACEI)和血管緊張素受體拮抗劑 (angiotensin II eceptorblocker，ARB)阻斷腎素血管緊張素系統(tǒng)

4、或使用抗炎藥物霉酚酸酯(mycophenolate mofetil，MMF) 和咪唑立賓能明顯減輕腎臟損傷。單用ACEI或MMF可延緩糖尿病腎病進(jìn)展，但只能使腎組織結(jié)構(gòu)得到部分恢復(fù)。以前曾報(bào)道過，聯(lián)合使用依那普利(一種ACEI)和 MMF 治療糖尿病腎病要優(yōu)于單獨(dú)給藥。本研究旨在探討應(yīng)用ACEI和抗炎藥聯(lián)合應(yīng)用對糖尿病大鼠腎臟CTGF表達(dá)的影響。進(jìn)一步了解 ACEI 和抗炎藥對糖尿病腎病的保護(hù)作用機(jī)理。 方法：建立單側(cè)腎切除鏈脲

5、佐菌素(treptozotocin，STZ)誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型，隨分成五組：對照組(C)、糖尿病組(DM)、依那普利給藥組(DM+E，10mg·kg<'-1>·d<'-1>，灌胃)、MMF給藥組(DM+M，10mg·kg<'-1>·d<'-1>，灌胃)及依那普利與MMF聯(lián)合給藥組(DM+E+M，同時(shí)予依那普利與 MMF 各10 mg·kg<'-1>·d<'-1>灌胃)，每組10只。8周后觀察24h尿白蛋白排泄率(albumin exc

6、retion rate，AER)的變化，并行：PAS染色測定腎小球平均容量(V<,G>)及腎小管一間質(zhì)面積，進(jìn)行腎小球與腎小管一間質(zhì)病理觀察；應(yīng)用免疫組化方法檢測腎組織CTGF蛋白表達(dá)。 結(jié)果： 1．各組大鼠血糖、體重、腎重、相對腎重的變化：與對照組相比，糖尿病組及各治療組血糖明顯升高(p<0.01)，與糖尿病組相比依那普利與霉酚酸酯單給藥組及聯(lián)合給藥組對血糖有所影響，均有不同程度地下降，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的意義。與對照組相比

7、，糖尿病組體重明顯下降(p<0.01)，各治療組體重下降不明顯；與對照組相比，糖尿病組腎重和相對腎重明顯增加，依那普利與霉酚酸脂單給藥組及聯(lián)合給藥組可抑制腎重和相對腎重的增加，依那普利與霉酚酸脂聯(lián)合給藥組腎臟肥大指數(shù)明顯低于依那普利或霉酚酸脂單給藥組。(p<0.05)。 2．各組大鼠24小時(shí)尿白蛋白排泄率(albumin excretion rate，AER)的變化：與對照組相比，糖尿病組24h尿白蛋白排泄率明顯升高(P<0.0

8、1)，依那普利與霉酚酸酯單給藥組及聯(lián)合給藥組與糖尿病組相比24h尿白蛋白排泄率明顯減少(p<0.05，p<0.01)；依那普利與霉酚酸酯聯(lián)合給藥組24h尿白蛋白排泄率明顯低于依那普利或霉酚酸酯單給藥組(p<0.05)。 3．各組大鼠腎組織病理形態(tài)學(xué)變化：糖尿病組腎小球平均容量與腎小管一間質(zhì)損傷指數(shù)(TII)均明顯高于對照組(p<0.05，p<0.01)；各組V<,G>明顯低于糖尿病組(p<0.05，p<0.01)，依那普利與MM

9、F聯(lián)合組優(yōu)于單給藥組(p<0.05)；依那普利與MMF單給藥組TII有所下降，但未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，聯(lián)合組TII明顯低于糖尿病組(p<0.05)。 4．各組大鼠腎組織CTGF免疫組化指標(biāo)變化：對照組腎組織僅有極少部分的腎小球及腎小管一間質(zhì)表達(dá)較弱的CTGF，糖尿病組腎小球和腎小管-間質(zhì)CTGF表達(dá)明顯高于對照組(P<0.01)，各給藥組CTGF表達(dá)明顯低于糖尿病組(P<0.01)，其中依那普利與霉酚酸酯聯(lián)合給藥組與單給藥組相比更加降