性成熟前山羊卵泡發(fā)育過(guò)程中幾種類(lèi)固醇生成酶mRNA的表達(dá).pdf

1、哺乳動(dòng)物繁殖后代的首要事件就是卵泡發(fā)育。卵泡的發(fā)育和分化與類(lèi)固醇合成能力的增加密切相關(guān)，而類(lèi)固醇的合成能力依賴于類(lèi)固醇生成酶細(xì)胞色素P450超家族成員的表達(dá)和活性。人們已經(jīng)從不同角度研究了不同物種類(lèi)固醇生成酶的表達(dá)，結(jié)果表明類(lèi)固醇生成酶的表達(dá)具有種屬特異性。然而，關(guān)于山羊類(lèi)固醇合成酶表達(dá)尚未見(jiàn)系統(tǒng)研究。本實(shí)驗(yàn)用RT-PCR方法對(duì)P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)、P45017α-羥化酶(P450c17)和P450芳香化酶(P45

2、0arom)在山羊卵泡發(fā)育和閉鎖過(guò)程中的表達(dá)進(jìn)行了定位和半定量研究。同時(shí)，把這三種類(lèi)固醇生成酶在性成熟前山羊的表達(dá)與性成熟山羊的表達(dá)進(jìn)行了比較。 研究結(jié)果表明：1、山羊腔前卵泡不表達(dá)P450arom，但表達(dá)P450scc和P450c17。這說(shuō)明山羊腔前卵泡具有合成孕烯醇酮和雄烯二酮的能力，而不具備合成雌二醇的能力。2、0.2-0.5mm有腔卵泡開(kāi)始表達(dá)P450arom，并且繼續(xù)表達(dá)P450scc和P450c17；隨著卵泡直徑的增

3、大這三種酶表達(dá)量增強(qiáng)。這說(shuō)明，當(dāng)卵泡發(fā)育到0.2-0.5mm時(shí)已經(jīng)具有合成孕激素、雄激素和雌激素的能力，而且這三種激素的合成能力隨著卵泡直徑的增大而增強(qiáng)。3、卵母細(xì)胞不表達(dá)P450scc、P450c17和P450arom；卵泡膜細(xì)胞表達(dá)P450scc和P450c17，但不表達(dá)P450arom；卵泡壁顆粒細(xì)胞和卵丘細(xì)胞都表達(dá)P450scc和P450arom，但都不表達(dá)P450c17。4、閉鎖卵泡都表達(dá)P450scc和P450c17，不表達(dá)

4、P450arom；P450scc的表達(dá)量與同一直徑健康卵泡的表達(dá)量差異不顯著；P450c17的表達(dá)量顯著低于同一直徑健康卵泡中的表達(dá)量，而且，不同直徑閉鎖卵泡中P450c17的表達(dá)沒(méi)有差異。這說(shuō)明卵泡中雄激素合成能力降低和失去雌激素合成能力可能是造成卵泡閉鎖的主要原因。5、P450c17和P450arom在性成熟和性未成熟山羊健康有腔卵泡中的表達(dá)模式相似；而P450scc在性成熟山羊黃體期卵巢的大卵泡中表達(dá)量顯著低于在性未成熟山羊卵巢和