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文檔簡介
1、目的:目前研究發(fā)現,VD的發(fā)生、發(fā)展與多種病理程序有關。有人認為HCY本身對血管及凝血系統(tǒng)的毒性作用,促進血管平滑肌細胞增生,抑制內皮細胞的增生;誘導單核細胞轉變?yōu)榕菽毎?。綜上,高HCY血癥在腦血管疾病的病中所起的作用越來越被認識,但還需更深刻的研究。
C-反應蛋白在生理濃度下促進血管細胞和細胞內粘附分子的正確表達。但在急性炎癥反應時期,血中CRP會迅速增加至正常血清中含量的1000倍以上。研究證實CRP不僅是炎癥的一
2、種指標,其本身也參與了炎癥反應的過程,且有致動脈粥樣硬化的作用。
正常較低濃度IL-6發(fā)揮中樞免疫介導、神經修復等生理作用,而缺血狀態(tài)下高濃度的炎性細胞因子IL-6可能參與神經損傷??傊?,IL-6水平影響腦缺血的病情及預后。
在VD大鼠模型中,是否同時存在HCY、CRP和IL-6水平的變化及三種指標之間的關系,以及丁苯酞膠囊能否阻斷慢性缺血性腦損傷中的多個病理環(huán)節(jié),本實驗通過建立血管性癡呆大鼠模型,分別測定海
3、馬區(qū)HCY、CRP和IL-6的水平,進一步探討丁苯酞治療VD的藥理機制。
方法:
第一部分:以SD老齡雄性大鼠為研究對象,隨機分為假手術組、模型組、丁苯酞組。應用雙側頸總動脈永久結扎法,結扎雙側頸總動脈的遠近心端,并從中間剪斷來制備VD動物模型,造模術后4周丁苯酞組給予丁苯酞軟膠囊200mg/kg只,每日灌胃(丁苯酞用花生油稀釋至2m1),一日一次,共四周;同時假手術組和模型組則給予等量的花生油灌胃,每日一次
4、,共四周。各組大鼠分別于灌胃四周后應用MG-2Y-型迷宮實驗對其進行學習和記憶能力測試。第二部分:分別進行HE染色和NISSL染色,并觀察各組大鼠海馬組織的病理變化,采用ELISA法測定HCY,用SP等免疫組化技術,觀察各組大鼠海馬區(qū)組織CRP和IL-6的表達變化;
結果:
1、Y迷宮實驗:模型組大鼠的學習及記憶能力均明顯下降,與模型組和丁苯酞組相比,假手術組學習達標所需電擊次數最少,而正確記憶次數最多;丁苯
5、酞組較模型組學習和記憶能力有所改善。
2、HCY測定:模型組平均血漿Hcy水平明顯高于假手術組;有顯著性差異。
3、HE染色:假手術組海馬區(qū)神經元排列規(guī)則致密,數量最多,細胞核大且圓,核仁清晰;與假手術組相比,模型組海馬區(qū)神經元結構紊亂,數目最少,排列最松,細胞核固縮,深染,胞漿周圍還有空暈;丁苯酞組神經元較模型組有所改善。
4、NISSL染色:假手術組神經元清晰,細胞結構完整,胞漿中布滿了深藍
6、色呈顆粒狀的尼氏體;模型組細胞皺縮變形,體積變小,胞漿尼氏體著色淺淡;丁苯酞組較模型組有所改善。
5、SP免疫組化CRP的變化:CRP的陽性表達產物顯示黃色,位于細胞漿及細胞核內。模型組可見細胞漿和細胞核內有大量的棕黃色顆粒,染色較深;而假手術組CRP陽性細胞數目減少,著色變淡,丁苯酞組陽性細胞較模型組減少,染色變淺。
6、SP免疫組化IL-6的表達:細胞胞漿中棕黃色顆粒者為陽性細胞。模型組著色最重,可見大量
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