紫貽貝對(duì)厚殼貽貝遺傳漸滲研究及兩者16SrRNA序列比較分析.pdf

1、貽貝是重要的經(jīng)濟(jì)貝類之一。厚殼貽貝是我國(guó)的南方品種，1973年，紫貽貝從北方移植到浙江嵊泗厚殼貽貝養(yǎng)殖海區(qū)進(jìn)行養(yǎng)殖，最近幾年出現(xiàn)了外形上有別于厚殼貽貝與紫貽貝的個(gè)體，本研究從形態(tài)與分子生物學(xué)方面對(duì)我國(guó)浙江嵊泗厚殼貽貝、紫貽貝養(yǎng)殖群體遺傳漸滲進(jìn)行了研究。 運(yùn)用聚類分析、主成分分析和判別分析三種多元分析方法，采用10個(gè)形態(tài)比例性狀，對(duì)紫貽貝、厚殼貽貝遺傳漸滲的形態(tài)表現(xiàn)進(jìn)行研究。從外觀上看，雜交貽貝介于紫貽貝與厚殼貽貝之間。聚類分析結(jié)

2、果表明，雜交貽貝與厚殼貽貝的形態(tài)相近。主成分分析的結(jié)果表明，雜交貽貝的形態(tài)受厚殼貽貝與紫貽貝的共同影響，雜交貽貝的形態(tài)與厚殼貽貝比較接近。判別分析表明，雜交貽貝、厚殼貽貝與紫貽貝三種貽貝的形態(tài)差異顯著(P＜0.01)。判別準(zhǔn)確率P1為91.42～93.85％，P2為78.05～98.39％。判別效果依次為紫貽貝＞厚殼貽貝＞雜交貽貝，平均擬合概率為92.77％。從上述分析可以看出，雜交貽貝是另外一個(gè)種，是厚殼貽貝與紫貽貝的雜交種，也就是厚

3、殼貽貝與紫貽貝之間發(fā)生了漸滲現(xiàn)象。也用逐步判別篩選出的5個(gè)形態(tài)參數(shù)建立了區(qū)分紫貽貝、厚殼貽貝和雜交貽貝的判別函數(shù)。 運(yùn)用ISSR標(biāo)記對(duì)紫貽貝、厚殼貽貝遺傳漸滲進(jìn)行研究。取外套膜組織，以酚-仿抽提方法提取DNA，利用篩選獲得的12條ISSR引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)2％的瓊脂糖凝膠電泳分離、EB染色，運(yùn)用Popgene軟件對(duì)電泳結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果表明，厚殼貽貝與紫貽貝的特異性標(biāo)記在雜交貽貝中有所反應(yīng)，進(jìn)一步證實(shí)了厚殼貽貝與紫貽

4、貝發(fā)生了雜交和基因漸滲現(xiàn)象。在雜交群體中主要以回交個(gè)體的為主，回交個(gè)體占65％。目前由于人工捕撈、環(huán)境改變以及外來(lái)種的引進(jìn)的影響，要求我們對(duì)厚殼貽貝的種質(zhì)資源進(jìn)行保護(hù)。 對(duì)厚殼貽貝、紫貽貝線粒體DNA16SrRNA基因片段進(jìn)行了擴(kuò)增和測(cè)序，得到了315bp的堿基序列，并對(duì)其進(jìn)行分析，結(jié)果顯示：厚殼貽貝、紫貽貝線粒體DNA16SrRNA基因片段的堿基組成分別為，30.9％(T)、14.2％(C)、32.0％(A)、22.9％(G)

5、和31.3％(T)、15.4％(C)、30.8％(A)、22.5％(G)，其A+T含量為61.9～63.2％。兩種內(nèi)各個(gè)個(gè)體間的平均核苷酸序列的變異率為0.0254和0.0381，其中厚殼貽貝有1個(gè)堿基變異為轉(zhuǎn)換；有3個(gè)顛換，其中以GT顛換為主，另外還有3個(gè)缺失或插入位點(diǎn)。它們的轉(zhuǎn)換比顛換值為0.4；而紫貽貝有6個(gè)堿基變異為轉(zhuǎn)換，其中AG和TC之間的轉(zhuǎn)換數(shù)分別為4個(gè)和2個(gè)；有3個(gè)發(fā)生了TG顛換，另外還有2個(gè)缺失或插入位點(diǎn)。它們的轉(zhuǎn)換比顛