紫貽貝(Mytilus edulis Linnaeus)多糖的提取分離及結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、紫貽貝(Mytilus edulis Linnaeus)俗稱海虹,屬軟體動(dòng)物門,廣泛分布于我國遼寧、山東、浙江等省沿海。紫貽貝資源豐富,肉味鮮美,營養(yǎng)價(jià)值高,素有“海洋雞蛋”之稱,并且紫貽貝多糖具有抗凝血、抗腫瘤、免疫功能調(diào)節(jié)等生物活性。本文以來源于青島湖島海域的紫貽貝為原料,采用不同的方法提取得到紫貽貝粗多糖,對它們的基本理化性質(zhì)進(jìn)行了較為系統(tǒng)的分析,并采用凝膠滲透和陰離子交換柱層析進(jìn)行兩步純化,得到了多個(gè)具有較高純度的多糖組分。通過

2、多種化學(xué)分析及現(xiàn)代儀器分析技術(shù),確定了60℃熱水提取(HW)多糖組分(HWS)的結(jié)構(gòu),并對酶提(MT)多糖組分(MT0-A1)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步研究。
　　 采用冷水、60℃熱水、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶聯(lián)合酶解提取紫貽貝粗多糖,并對冷水提粗多糖(LT)、HW粗多糖、MT粗多糖進(jìn)行理化性質(zhì)分析。PMP柱前衍生高效液相色譜法測得LT和HW單糖組成較簡單,主要是葡萄糖(Glc)。MT的單糖組成比較復(fù)雜,主要含有Glc、氨基葡萄糖(GlcN

3、)、甘露糖(Man)、氨基半乳糖(GaIN)、半乳糖(Gal)和巖藻糖(Fuc)。
　　 對LT和MT分別采用Q Sepharose4 Fast Flow離子交換柱層析、SepharcrylS300和SephadexTM G-25 Fine凝膠排阻柱層析進(jìn)一步純化,得到了LTS1-A1、LTS1-B、LTS2-B1、LTS2-B2、MT0-A1和MT1-B1具有較高純度的多糖組分,高效凝膠色譜圖顯示色譜峰單一、對稱,重均相對分子

4、質(zhì)量分別為31.8、40.7、48.1、47.4、3.9和4.8 kD。LTS1-A1的單糖組成較簡單,主要由Glc組成;LTS1-B主要含有Man、GlcN、GalN、Glc、Gal和Fuc;LXS2-B1、LXS2-B2、MTO-A1和MT1-B1的單糖組成相似,主要由Man、GlcN、GalN、Gal和Fuc組成。
　　 HW經(jīng)Sepharcryl S300凝膠層析分離得到一種具有較高純度的多糖組分HWS,總糖含量為98.

5、5％,蛋白含量1.1％,相對分子質(zhì)量為574.5 kD。在對其基本理化性質(zhì)進(jìn)行研究的基礎(chǔ)上,對HWS采用甲基化和氣質(zhì)聯(lián)用(GC/MS)分析、高碘酸氧化和Smith降解、紅外光譜(FT-IR)、核磁共振(NMR)技術(shù)對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了深入研究,證實(shí)HWS是以(1→4)-α-D-Glcp為主鏈,含有少量的→2,4)-Glcp-(1→和→6)-p-Glc(1→分支的葡聚糖,平均每6個(gè)主鏈糖殘基含有1個(gè)分支。
　　 采用甲基化和GC/MS分

6、析、FT-IR、2D NMR技術(shù)對MT0-A1的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步研究,結(jié)果表明:MT0-A1主要含有→3)-β-D-GlcNAcp-(1→;α-L-Fucp-(1→和→3)-α-L-Fucp:→2)-α-D-Galp-(1→:→3)-α-D-Manp-(1→和→4)-α-D-GalNAcp-(1→等結(jié)構(gòu)單元。
　　 雖然紫貽貝多糖理化性質(zhì)和生物活性的初步研究已有報(bào)道,但有關(guān)紫貽貝多糖較為系統(tǒng)的理化性質(zhì)、分離純化和結(jié)構(gòu)方面的研究報(bào)道