高糖環(huán)境下OREBP在晶狀體上皮細(xì)胞中的表達(dá)及調(diào)控機(jī)制.pdf

1、目的:探討滲透壓反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（smotic response element binding protein，OREBP）在人晶狀體上皮細(xì)胞（HLEC）中的表達(dá)及在高糖環(huán)境下的表達(dá)變化及調(diào)控機(jī)制，明確其在晶狀體上皮細(xì)胞中的作用。
　　方法:（1）體外培養(yǎng)人的晶狀體上皮細(xì)胞系SRA01/04，分為兩組：正常對(duì)照組，葡萄糖濃度為25mmol/L,高糖培養(yǎng)組，葡萄糖濃度為300mmol/L,用Real-time RT-PCR和wes

2、tern blot檢測(cè)高糖刺激后細(xì)胞內(nèi)OREBP的表達(dá)變化。然后用ERK、P38抑制劑預(yù)處理HLEC45分鐘后再培養(yǎng)于300mmol/L葡萄糖培養(yǎng)液中，用Real-time RT-PCR，western blot檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)OREBP的表達(dá)變化。（2）收集2013年10月到2014年4月在青島大學(xué)附屬醫(yī)院眼科就診并行phaco+IOL植入手術(shù)的白內(nèi)障患者的晶狀體前囊膜，以103例（103眼）糖尿病患者前囊膜為病例組，154例（154眼）非

3、糖尿病患者囊膜為對(duì)照組，以10例（10眼）無(wú)償捐獻(xiàn)的透明囊膜為空白對(duì)照。應(yīng)用Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)各組前囊膜組織中OREBP mRNA的表達(dá)，免疫熒光技術(shù)檢測(cè)OREBP蛋白水平的表達(dá)。（3）STZ誘導(dǎo)SD大鼠2型糖尿病模型，分別于2周、4周、8周、10周、12周斷頭法處死后取晶狀體前囊膜用Real-time RT-PCR檢測(cè)OREBP的表達(dá)變化。
　　結(jié)果:（1）OREBP在人晶狀體上皮細(xì)胞表達(dá)，高糖刺激后OREBP

4、mRNA及蛋白表達(dá)明顯升高，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；ERK,P38抑制劑預(yù)處理后，高糖刺激晶狀體上皮細(xì)胞后OREBPmRNA及蛋白表達(dá)未發(fā)生明顯升高，前后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；（2）OREBP在糖尿病患者晶狀體前囊膜組織中表達(dá)高于健康白內(nèi)障患者，且二者均高于透明囊膜。（3）糖尿病大鼠晶狀體囊膜組織中OREBP mRNA表達(dá)于2周時(shí)升高最為顯著，后逐漸下降，但始終高于健康大鼠囊膜組織。
　　結(jié)論:（