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1、目的:觀察高糖對(duì)培養(yǎng)的大鼠晶狀體上皮細(xì)胞線粒體活性氧、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的影響及茶多酚干預(yù)后的變化,研究高糖對(duì)大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的影響及茶多酚的干預(yù)作用,初步探討糖尿病性白內(nèi)障的發(fā)病機(jī)制及茶多酚抗糖尿病性白內(nèi)障的效果。
方法:1、體外培養(yǎng)大鼠晶狀體上皮細(xì)胞,加入不同濃度的葡萄糖,模擬體內(nèi)高血糖條件,加入不同濃度茶多酚進(jìn)行干預(yù),觀察高糖條件下及茶多酚干預(yù)后大鼠晶狀體上皮細(xì)胞形態(tài)的變化。
2、共聚焦顯微鏡檢測(cè)各條件下大鼠晶狀體上皮細(xì)
2、胞線粒體活性氧量的變化,分析高糖及茶多酚干預(yù)對(duì)細(xì)胞線粒體活性氧表達(dá)的影響。
3、流式細(xì)胞儀檢測(cè)各條件下大鼠晶狀體上皮細(xì)胞線粒體膜電位和細(xì)胞死亡率的變化,分析高糖及茶多酚干預(yù)對(duì)細(xì)胞線粒體膜電位、細(xì)胞死亡率的影響。
4、免疫細(xì)胞化學(xué)及免疫熒光化學(xué)檢測(cè)各條件下大鼠晶狀體上皮細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的表達(dá)情況,分析高糖及茶多酚干預(yù)對(duì)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的影響。
結(jié)果:1、在高糖條件下的上皮細(xì)胞逐漸死亡,數(shù)量明顯減少,傳代后容易老化。而用茶
3、多酚干預(yù)的高糖條件的上皮細(xì)胞則較好的保持了上皮細(xì)胞的形態(tài),未見(jiàn)減少,傳代未見(jiàn)老化。
2、在高糖條件下的上皮細(xì)胞線粒體活性氧產(chǎn)生的增多,而應(yīng)用茶多酚干預(yù)組活性氧的產(chǎn)生明顯減少。
3、在高糖條件下的上皮細(xì)胞死亡率明顯升高,線粒體膜電位降低;而茶多酚干預(yù)組細(xì)胞死亡率降低,線粒體膜電位升高。
4、經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫熒光檢測(cè),高糖條件下大鼠晶狀體上皮細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的陽(yáng)性率明顯降低,而應(yīng)用茶多酚干預(yù)后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的陽(yáng)性率明顯
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