245例大腸埃希菌臨床分離株藥敏分析及anr基因的檢測(cè).pdf

1、目的：近年來，大腸埃希菌的耐藥性越來越嚴(yán)重，及時(shí)了解其耐藥規(guī)律和趨勢(shì)，能為臨床合理選用抗生素提供依據(jù)。喹諾酮類藥物是全人工合成的抗菌藥物，被普遍用于臨床治療各種感染性疾病，其作用機(jī)制是：通過外膜孔蛋白和磷脂滲透進(jìn)入細(xì)菌，并作用于DNA旋轉(zhuǎn)酶，干擾細(xì)菌DNA復(fù)制、修復(fù)和重組。但隨著這類藥物的廣泛使用，其耐藥性也日趨嚴(yán)重，細(xì)菌對(duì)喹諾酮類藥物的耐藥機(jī)制主要由染色體介導(dǎo)，它包括藥物作用靶位的改變、外膜通透性降低、主動(dòng)外排泵亢進(jìn)三個(gè)方面，1998

2、年，Martinez-Martinez等在1株肺炎克雷伯菌中發(fā)現(xiàn)了qnr基因，其編碼的蛋白Qnr能保護(hù)喹諾酮類藥物作用的靶位點(diǎn)DNA促旋酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ，使喹諾酮類藥物不易與其結(jié)合，從而導(dǎo)致藥物治療失敗。該基因由質(zhì)粒所攜帶，可以在同種或不同細(xì)菌之間水平傳播，引起細(xì)菌耐藥性的快速、廣泛傳播，臨床危害性更大。這種新的細(xì)菌耐藥機(jī)制稱之為質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類抗菌藥物耐藥(plasmid-mediated quinolone resistance，

3、PMQR)。質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮耐藥機(jī)制補(bǔ)充了傳統(tǒng)的細(xì)菌對(duì)喹諾酮耐藥途徑，使細(xì)菌對(duì)喹諾酮耐藥形式多樣化。qnr基因在世界以及國(guó)內(nèi)各地已有不少報(bào)道，且各地區(qū)間的流行情況及亞型的分布存在很大差異，本研究旨在了解衡水地區(qū)大腸埃希菌的藥敏情況以及qnrA、qnrB、qnrS的存在情況和其耐藥特征，以更好的為臨床用藥提供依據(jù)。
　　 方法：我們收集了哈勵(lì)遜國(guó)際和平醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室2008年12月-2010年6月間所有送檢大腸埃希菌株245例進(jìn)

4、行檢測(cè)分析，采用肉湯稀釋法測(cè)18種抗菌藥物最低抑菌濃度(MIC)并計(jì)算其MIC50和MIC90;采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)qnr基因；瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物分子量，PCR陽(yáng)性擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過DNA測(cè)序，并在GenBank對(duì)比確定基因亞型。
　　 結(jié)果：抗生素敏感試驗(yàn)結(jié)果顯示，亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦和頭孢哌酮/舒巴坦對(duì)大腸埃希菌敏感，哌拉西林、頭孢唑林、頭孢呋辛、頭孢哌酮、頭孢噻肟、頭孢吡肟、頭孢他啶、氨曲南、慶大

5、霉素、阿米卡星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、米諾環(huán)素、呋喃妥因?qū)Υ竽c埃希菌的耐藥率分別為84.9％、74.2％、75.5％、80％、77.6％、37.9％、43.7％、51％、55.9％、20.8％、77.1％、73.9％、70.2％、59.2％、2.4％。245例大腸埃希菌中檢出5株存在qnrB基因，占2.0％，1株存在qnrS基因，占0.4％。
　　 結(jié)論：以上研究表明，我院檢出的大腸埃希菌存在多重耐藥，245例菌中，僅