NINJ2影響動(dòng)脈粥樣硬化形成的分子機(jī)制研究.pdf

1、動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis,AS）是一種常見(jiàn)的心血管疾病，由遺傳、環(huán)境及兩者相互作用引起，主要包括冠心?。–AD）、腦卒中（stroke）等。全球每年死于動(dòng)脈粥樣硬化引起的心血管疾病患者占總死亡人數(shù)的29％。自2007年以來(lái)，多項(xiàng)全基因組關(guān)聯(lián)分析（GWAS）研究揭示了與AS相關(guān)的易感位點(diǎn)和易感基因，但是其遺傳和分子機(jī)制尚不明確，2009年通過(guò)一項(xiàng)對(duì)四個(gè)前瞻性群體的全基因組關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)了與腦卒中顯著相關(guān)的基因NINJ2，

2、位于染色體12p13，但是目前對(duì)NINJ2基因功能相關(guān)研究很少，尤其是在具體AS相關(guān)生理病理過(guò)程中的影響。因此，本論文主要從細(xì)胞、蛋白、分子水平，研究NINJ2基因影響AS形成的分子機(jī)制。
　　在本研究中，我們通過(guò)蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)軟件及細(xì)胞亞定位實(shí)驗(yàn)確定了NINJ2編碼蛋白Ninjurin2是定位在細(xì)胞膜上的二次跨膜蛋白。為了檢測(cè)Ninjurin2蛋白在細(xì)胞粘附中的作用，在細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)中，用siRNA敲低HUVEC細(xì)胞中NINJ2的表

3、達(dá)，結(jié)果顯示THP-1細(xì)胞對(duì)于HUVEC細(xì)胞的粘附顯著降低，說(shuō)明Ninjurin2作為一個(gè)粘附分子參與了單核細(xì)胞對(duì)內(nèi)皮的粘附。為了研究NINJ2與AS相關(guān)基因的調(diào)控關(guān)系，實(shí)驗(yàn)中用干擾NINJ2基因表達(dá)的HUVEC細(xì)胞進(jìn)行了動(dòng)脈粥樣硬化抗體芯片和趨化因子抗體芯片表達(dá)分析，分析得出的結(jié)果用實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)敲低NINJ2表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞中CCL19、CCL20、CCL25、CCL28、BLC、RANTES、TLR4-1、GCSF、IL-6

4、、TNF-α、ICAM-1表達(dá)量顯著下調(diào)，這些基因編碼的趨化因子、粘附分子在炎癥反應(yīng)中對(duì)白細(xì)胞的募集、遷移和粘附起到了重要作用，這進(jìn)一步說(shuō)明 NINJ2通過(guò)調(diào)控與白細(xì)胞粘附相關(guān)的基因參與到AS形成的炎癥反應(yīng)過(guò)程中。為了進(jìn)一步研究Ninjurin2蛋白是否存相互作用蛋白，我們利用Pull-down技術(shù)在細(xì)胞中尋找與Ninjurin2蛋白相互作用的受體靶蛋白，但結(jié)果并未找到相互作用蛋白，具體的靶點(diǎn)作用蛋白仍然有待進(jìn)一步研究。
　　綜上