伴有t(6;11)(q27;q23)易位的裸小鼠高致瘤性人單核細胞白血病細胞系SHI-1的建立和鑒定.pdf

1、該研究擬通過對急性髓性白血病(AML)患者原代白血病細胞的體外培養(yǎng),建立有特異性染色體異常的AML細胞系,并對其生物學特性進行較為全面的鑒定,為白血病或其它腫瘤研究提供一個有價值的研究工具.結論:(一)報道1例伴有t(6;11)(q27;q23)易位和早期復發(fā)時出現(xiàn)核型演變的AML-M5b病例,并對其進行了深入的遺傳學研究.結果證實該例為伴有導致MLL-AF6重排的t(6;11)易位和導致1個p53等位基因缺失的del(17)(p11)

2、核型演變同時伴有另一p53等位基因點突變的急性單核細胞白血病,二者均和該例的不良預后有關.(二)從1例AML-M5b病例建立1株人單核細胞白血病細胞系SHI-1,形態(tài)學和免疫表型呈現(xiàn)典型的單核系特征.SHI-1伴有特異性的染色體易位t(6;11)(q27;q23),RT-PCR檢出MLL/AF6,FISH檢測也顯示MLL基因在易位中被累及.M-FISH在傳代至2003年3月3日的SHI-1細胞中檢出隱匿性的7號和13號染色體之間的易位和

3、8號染色體來源的微小體.應用p53基因探針進行的FISH證實SHI-1細胞存在p53基因的缺失,PCR產(chǎn)物的測序結果顯示另一位點p53基因的5號外顯子存在TCC→CCC的點突變.明膠酶譜分析顯示SHI-1細胞上清中有較高濃度MMP-2和MMP-9的分泌,其中MMP-2可能與SHI-1細胞較強的遷移能力有關.EB病毒和支原體污染被排除.STR-PCR證實SHI-1細胞和原代白血病細胞來自同一體.SHI-1細胞具有較強的集落形成能力.IL-

4、4和IL-5可促進SHI-1細胞的增殖,IFN-γ、TNFα、IL-2、PDGF和IL-7可抑制SHI-1細胞的增殖.(三)SHI-1細胞存在著多藥耐藥,其中對VP16最為明顯,其耐藥機制可能與LRP和GST-Π的高表達有關.(四)SHI-1細胞在裸小鼠皮下有很強的致瘤性.(五)TB對SHI-1細胞具有誘導分化和凋亡的雙向調(diào)節(jié)作用.TPA可誘導SHI-1細胞分化和貼壁.0.5mM、1.0mM和2.0mM As<,2>O<,3>可誘導SH