二甲雙胍通過(guò)AMPK依賴性自噬作用對(duì)MIN6細(xì)胞產(chǎn)生雙重作用.pdf

1、目的：探討二甲雙胍對(duì)正常與高脂培養(yǎng)環(huán)境下胰島β細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制。
　　方法：將MIN6小鼠胰島β細(xì)胞株培養(yǎng)在正常培養(yǎng)液環(huán)境或棕櫚酸培養(yǎng)環(huán)境下，分別或者同時(shí)加入二甲雙胍(metformin)、特異性AMPK（AMP-activatedproteinkinase，腺苷酸活化蛋白激酶）激活劑AICAR(5-Aminoimidazole-4-carboxamide1-β-D-ribofuranoside)、特異性AMPK信號(hào)抑制劑c

2、ompoundC，特異性自嗜作用抑制劑3-MA(3-methyladenine)。采用2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-（4-硝基苯基）-5-(2，4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽(CCK-8)比色法觀察不同處理組小鼠胰島β細(xì)胞存活率;流式細(xì)胞術(shù)、TUNELassay檢測(cè)細(xì)胞的凋亡率;Westernblot法檢p-AMPK、C-caspase3、LC3B-Ⅱ的表達(dá)。
　　結(jié)果：1、在正常培養(yǎng)環(huán)境下，二甲雙胍組與空白對(duì)照組細(xì)胞相

3、比，生存率降低，凋亡增加。C-caspase3、LC3BⅡ、p-AMPK表達(dá)升高。2、在高游離脂肪酸培養(yǎng)環(huán)境下，二甲雙胍組與空白對(duì)照組細(xì)胞相比，生存率升高，凋亡減少，C-caspase3表達(dá)減少，LC3BⅡ、p-AMPK表達(dá)升高。3、無(wú)論在正常培養(yǎng)環(huán)境下還是高游離脂肪酸培養(yǎng)環(huán)境下，AICAR與二甲雙胍作用相同。4、無(wú)論在正常培養(yǎng)環(huán)境下還是高游離脂肪酸培養(yǎng)環(huán)境下，compoundC與3-MA均可抑制二甲雙胍的作用。
　　結(jié)論：二甲雙