肺癌患者血漿游離核酸EGFR基因突變篩查及其與吉非替尼療效相關(guān)性研究.pdf

1、研究目的： 肺癌是最常見的惡性腫瘤，其中80％為非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)，大多數(shù)病人就診時已為晚期，失去手術(shù)根治機(jī)會，傳統(tǒng)的放、化療療效差。以表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑(EGFR TKIs)如吉非替尼(Iressa)為代表的分子靶向治療藥物的發(fā)現(xiàn)，為非小細(xì)胞肺癌的治療帶來了新的曙光。然而，患者對這種分子靶向藥物的反應(yīng)性與個體的遺傳背景相關(guān)，多中心研究證實：肺癌患者EGFR基因18-21外顯子的特征性突變與吉非替尼療效密切

2、相關(guān)。因此，建立一種采樣方便、病人痛苦小、特異性好、靈敏度高、簡便易行易于在臨床應(yīng)用推廣的EGFR基因突變診斷方法是NSCLC患者應(yīng)用EGFR TKIs治療需要解決的重要問題，也是進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)新的遺傳藥物靶點進(jìn)行大樣本篩查的需要。本研究探討了肺癌患者胸水、血清和血漿游離核酸EGFR基因19及21外顯子突變檢出的可行性、建立了游離核酸酶切富集PCR檢測EGFR基因19外顯子缺失及21外顯子L858R突變的臨床診斷方法，并回顧性分析了游離核酸

3、EGFR基因19外顯子突變檢出對EGFR-TKIs治療反應(yīng)性的預(yù)測價值及其影響因素。 材料與方法： 1．肺癌患者游離核酸EGFR基因突變篩查方法的建立收集2006年9月至2007年4月該院68例原發(fā)性肺癌患者血漿標(biāo)本55份、血清標(biāo)本15份、胸水標(biāo)本23份和10例健康人血漿標(biāo)本及2例結(jié)核性胸膜炎患者胸水標(biāo)本。提取上清游離核酸，應(yīng)用巢式PCR及酶切富集PCR法檢測分析了EGFR基因外顯子19、21，比較了非酶切及酶切富集兩種

4、方法對EGFR基因突變檢出率的影響；分析了肺癌患者配對的15例血漿和血清標(biāo)本，以及配對的10例血漿與胸水標(biāo)本EGFR基因外顯子19、21基因突變的檢出情況，比較不同標(biāo)本來源對EGFR基因突變檢出的影響。 2．肺癌患者血漿游離核酸EGFR基因19、21外顯子突變的臨床意義收集2006年9月至2007年4月該院原發(fā)性肺癌患者64例血漿標(biāo)本，提取上清游離核酸，酶切富集PCR法分析EGFR基因外顯子19、21，比較不同臨床特點患者EGF

5、R基因突變情況，并對接受Iressa治療的16例患者的療效與EGFR基因突變的相關(guān)性及其影響因素進(jìn)行了分析。 結(jié)論： 1、肺癌患者血漿游離核酸酶切富集EGFR基因19和21外顯子突變檢測方法是簡便易行、臨床可行性強(qiáng)的方法。 2、EGFR基因19外顯子突變主要見于肺腺癌患者，本研究檢測的68例肺癌患者標(biāo)本檢出的EGFR基因突變以19外顯子缺失為主，21外顯子L858R突變少見，提示廣州地區(qū)人群患者EGFR基因突變的