白藜蘆醇在黑色素瘤小鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)及其抑制血管生成的研究.pdf

1、第一部分，白藜蘆醇在荷黑色素瘤小鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究
　　目的:初探白藜蘆醇(Resveratrol,Res)在C57BL荷黑色素瘤小鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)特征,為Res的進一步開發(fā)及臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。方法:通過皮下接種B16F10黑色素瘤細胞建立荷瘤小鼠模型。Res100mg/Kg單次給藥后,在不同時間點眼眶靜脈叢采血,實驗中以乙酸銨-甲醇(44:56)作為流動相,以ESI負離子模式和多級反應(yīng)離子檢測(MRM)作為質(zhì)譜條件。應(yīng)

2、用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-MS/MS)分析技術(shù)檢測血漿中Res濃度,采用DASver2.2藥動學(xué)程序處理實驗數(shù)據(jù)。結(jié)果:本實驗建立了同時檢測血中Res及Res主要代謝物的HPLC-MS/MS分析方法,主要藥代動力學(xué)參數(shù):AUC0-t為56.773±18.508μg/(L·h),AUC0-∞為113.547±43.135μg/(L·h),Tmax為0.167±0.034h,Cmax=5752.327±578.272μg/L,表觀

3、分布容積Vd為424.932±132.827L/kg,半衰期t1/2為2.228±0.934h,清除率CL為1761.391±323.425L/(h·kg)。結(jié)論:本研究明確了Res在荷黑色素瘤小鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)特征。
　　第二部分，白藜蘆醇對小鼠黑色素移植瘤血管生成的影響
　　目的:研究Res對小鼠黑色素瘤血管生成的影響及其作用機制,為Res的進一步開發(fā)及臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)和理論指導(dǎo)。方法:將實驗動物隨機分成空白對照組

4、、Res低劑量組、Res高劑量組和達卡巴嗪組,每組均為12只,接種后3天開始給藥:Control組,ig.CMC-Na溶液10mL/(kg·d);H-Res組,ig.100mg/(kg·d);L-Res組,ig.50mg/(kg·d);DTIC組,ip.40mg/(kg·3d)。以上各組均連續(xù)給藥3周。定期觀察移植瘤生長情況及荷瘤鼠的體重變化等。末次給藥后處死小鼠,采集腫瘤組織,稱取瘤重,計算抑瘤率。應(yīng)用免疫組織化學(xué)檢測CD34計算微血

5、管密度,并檢測腫瘤組織中MMP-2蛋白的表達。應(yīng)用Westernblotting方法檢測腫瘤組織中VEGF蛋白的表達。結(jié)果:荷瘤小鼠進食,飲水及活動情況良好。連續(xù)給藥21天后,L-Res組、H-Res組和DTIC組的抑瘤率分別為17.47％、40.98%和72.66%。與Control組相比,L-Res組、H-Res組和DTIC組的MVD降低,MMP-2及VEGF蛋白表達水平降低。結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)Res能夠降低MVD,下調(diào)MMP-2及V