維康醇和維泰醇誘導(dǎo)小鼠黑色素瘤分化的研究.pdf

1、本文主要研究抗腫瘤新藥維康醇和維泰醇對小鼠黑色素瘤細胞B16F0的生長抑制效應(yīng)及分化誘導(dǎo)作用。
　　通過將維康醇和維泰醇按照濃度梯度配制后,將藥物作用于B16F0細胞株48h和24h,用MTT法檢測維康醇和維泰醇對腫瘤細胞的增殖率的影響;用Giemsa染色法觀察維康醇和維泰醇對B16F0細胞形態(tài)的影響;用臺盼藍拒染法研究維康醇和維泰醇對B16F0細胞的致死率的影響;用分光光度法測定維康醇和維泰醇對黑色素生成量的影響,多巴氧化法測定

2、對酪氨酸酶活性影響RT-PCR法測定維康醇和維泰醇對酪氨酸酶及其相關(guān)蛋白Trp1和Trp2 mRNA表達水平的影響;軟瓊脂克隆形成實驗研究維康醇和維泰醇對細胞克隆形成能力的影響;同種動物體內(nèi)抑瘤模型研究維康醇誘導(dǎo)分化后B16F0細胞致瘤能力。
　　結(jié)果顯示,經(jīng)維康醇和維泰醇作用48h和24h后,兩種藥物對B16F0細胞的生長均有明顯的抑制作用,且隨著藥物濃度的增大,均呈現(xiàn)時間和劑量依賴性;經(jīng)維康醇和維泰醇作用后,B16F0細胞的形

3、態(tài)與對照組相比呈現(xiàn)明顯的變化,出現(xiàn)很多樹突狀的分支,隨藥物濃度增大分支越來越明顯;維康醇和維泰醇作用B16F0細胞后,胞內(nèi)和胞外黑色素含量均明顯增加,酪氨酸酶的活性也明顯升高。維康醇和維泰醇上調(diào)Tyrosinase,Trp-1,Trp-2的mRNA表達水平;.維康醇和維泰醇使B16F0細胞的克隆形成率明顯下降,隨著藥物濃度的增大,克隆數(shù)目明顯減少;經(jīng)維康醇誘導(dǎo)分化后的B16F0細胞,在小鼠體內(nèi)的致瘤性明顯降低。
　　本實驗得出結(jié)論