FISH臨床診斷技術(shù)規(guī)范的建立及其應(yīng)用.pdf

1、目的：(1)在我室已有技術(shù)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步優(yōu)化和標(biāo)準(zhǔn)化，集成創(chuàng)新建立用于臨床檢測(cè)的FISH(Fluorescent in situ hybriaization，F(xiàn)ISH)診斷技術(shù)規(guī)范。(2)應(yīng)用規(guī)范的FISH診斷技術(shù)對(duì)常見染色體非整倍體行快速產(chǎn)前診斷、染色體平衡易位攜帶者進(jìn)行胚胎植入前遺傳學(xué)診斷(preimplantation genetic diagnostic，PGD)、異常染色體核型鑒定等臨床檢測(cè)。 方法：(1)參考美國(guó)遺

2、傳學(xué)會(huì)(American College of Medical Genetics。ACMG)、美國(guó)病理家學(xué)會(huì)(College of American Pathologists，CAP)、美國(guó)費(fèi)城兒童醫(yī)院(Children's Hospital of Philadelphia)、歐洲人類生殖與胚胎學(xué)協(xié)會(huì)(European Society of Human Reproduction and Embryology，ESHRE)、國(guó)際胚胎植入前

3、遺傳學(xué)診斷協(xié)會(huì)(Preimplantation Genetic Diagnosis International Society,PGDIS)、日本長(zhǎng)崎大學(xué)研究生院生物醫(yī)學(xué)部(Nagasaki Universitv Graduate School of Biomedical Science)等機(jī)構(gòu)有關(guān)FISH用于臨床診斷的標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合我室現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)基礎(chǔ)制定一套完整的臨床診斷技術(shù)規(guī)范和制度規(guī)范。(2)以正常及染色體結(jié)構(gòu)異常攜帶者的外

4、周血淋巴細(xì)胞、建株淋巴細(xì)胞、產(chǎn)前胎兒羊水細(xì)胞、染色體核型正常夫婦IVF/ICSI(in-vitro fertilization/intracytoplasmic sperm iniection)后廢棄的卵裂球細(xì)胞等為檢測(cè)樣本，根據(jù)已經(jīng)確立的技術(shù)和制度規(guī)范對(duì)現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)技術(shù)進(jìn)行優(yōu)化和標(biāo)準(zhǔn)化，建立FISH臨床診斷技術(shù)規(guī)范。(3)將建立的檢測(cè)技術(shù)規(guī)范應(yīng)用于常見染色體非整倍體的快速產(chǎn)前診斷、染色體平衡易位攜帶者的PGD、異常染色體核型的鑒定等臨床實(shí)

5、踐。 結(jié)果：(1)成功建立了FISH臨床診斷技術(shù)規(guī)范。(2)快速產(chǎn)前診斷可疑染色體異常胎兒60例，發(fā)現(xiàn)18三體1例，21三體2例；(3)染色體易位攜帶者PGD 10例，其中羅氏易位攜帶者4例，平衡易位攜帶者6例。(4)應(yīng)用此規(guī)范體系確診可疑染色體異常核型6例，其中世界首報(bào)2例。綜合檢測(cè)成功率為95.7％，未見檢陽性、假陰性結(jié)果。達(dá)到了ACMG、PGDIS等國(guó)際機(jī)構(gòu)關(guān)于FISH用于臨床診斷的要求，相關(guān)指標(biāo)與國(guó)際其他機(jī)構(gòu)已有報(bào)道相基