雄激素誘導毛囊干細胞內(nèi)皮脂腺細胞分化的初步研究.pdf

1、毛囊隆突區(qū)(bulge region)是毛囊干細胞的主要棲息地，最近實驗證實隆突區(qū)干細胞不僅能遷移產(chǎn)生皮脂腺和表皮，而且能遷移產(chǎn)生新的毛囊。 皮脂腺細胞的生長和分化受視黃醛衍生物(retinoid)、激素(hormones)和細胞因子(cytokines)的調(diào)控。雄激素對皮脂腺細胞的發(fā)育成熟以及皮脂的合成分泌具促進作用。雄激素受體是一種配體依賴性的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白，參與雄激素激發(fā)的各種生理功能的調(diào)節(jié)。據(jù)文獻報道，在人的皮脂腺(seb

2、aceous gland,SG)的基底層和毛囊外根鞘(outer rootsheath，ORS)中均有雄激素受體的表達。 為了探索雄激素對毛囊干細胞定向分化為皮脂腺細胞的過程是否具有促進功能，我們進行了如下的實驗來進行研究： 第一步，檢測了在毛囊周期的三個不同時期(生長期、退化期和靜止期)中大鼠觸須毛囊干細胞中AR、ARmRNA的表達以及檢測原代培養(yǎng)的毛囊干細胞中AR的表達并探討意義，為進一步研究打下基礎(chǔ)。 第二

3、步，在體外培養(yǎng)毛囊干細胞并檢測了AR、K15、CD34以及β1-integrin的表達。 第三步，將培養(yǎng)細胞分成誘導組和對照組： ①誘導組細胞：改用添加了雄激素的誘導培養(yǎng)基來培養(yǎng)，以此誘導體外培養(yǎng)的毛囊干細胞向皮脂腺細胞的定向分化，檢測上皮膜抗原(epithelial membrane antigen，EMA)和脂滴在誘導細胞中的表達； ②對照組細胞：作對照，仍繼續(xù)用未添加雄激素的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，檢測上皮膜抗原(

4、epithelial membrane antigen，EMlA)和脂滴在對照細胞中的表達。 方法： 采用免疫組織化學技術(shù)檢測AR、K15、CD34、β1-integrin以及EMA的表達。采用油紅O組織化學染色技術(shù)檢測脂滴的形成情況。采用RT-PCR檢測AR mRNA的表達。在體外用添加了雄激素的培養(yǎng)基來誘導毛囊干細胞向皮脂腺細胞定向分化。 結(jié)果： 1．在體情況下，生長期、退化期和靜止期大鼠觸須毛囊干細

5、胞中均有AR表達。 2．AR在生長期呈強表達，而在退化期和靜止期表達微弱；AR mRNA在生長期呈強表達，而在退化期和靜止期表達微弱；AR表達變化趨勢與AR mRNA表達變化趨勢一致。AR表達變化趨勢與毛囊干細胞的增殖分化能力呈一致性。 3．體外情況下，培養(yǎng)的毛囊干細胞中有AR、K15、CD34和β1-integrin的表達。 4．用免疫細胞化學檢測到誘導后的細胞中EMA的表達呈陽性，而未經(jīng)誘導處理的細胞表達呈陰

6、性；用油紅O染色檢測到誘導后的細胞中有脂滴的形成，而在未經(jīng)誘導的細胞中沒有脂滴的形成。 結(jié)論： 1．大鼠觸須毛囊隆突區(qū)在整個毛囊周期中均有AR表達，是雄激素作用的靶組織。體外培養(yǎng)的毛囊干細胞亦是AR靶細胞并能較好地保持了其干細胞性。 2．AR和AR mRNA在毛囊周期中呈規(guī)律性表達，AR表達變化趨勢與AR mRNA表達變化趨勢一致。AR表達變化趨勢與毛囊干細胞的增殖分化能力呈一致性。 3．用免疫細胞化學檢