基質(zhì)細(xì)胞Cav-1表達(dá)影響骨髓瘤細(xì)胞對蛋白酶體抑制劑的敏感性.pdf

1、碩士學(xué)位論文論文題目基質(zhì)細(xì)胞Cav1表達(dá)影響骨髓瘤細(xì)胞對蛋白酶體抑制劑的敏感性研究生姓名陳露指導(dǎo)教師姓名傅晉翔（教授）專業(yè)名稱內(nèi)科學(xué)（血液病學(xué)）研究方向多發(fā)性骨髓瘤的基礎(chǔ)與臨床論文提交日期2013年3月基質(zhì)細(xì)胞Cav1表達(dá)影響骨髓瘤細(xì)胞對蛋白酶體抑制劑的敏感性中文摘要I基質(zhì)細(xì)胞Cav1表達(dá)影響骨髓瘤細(xì)胞對蛋白酶體抑制劑的敏感性中文摘要第一部分靶向人小窩蛋白caveolin1基因的shRNA真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及其在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株HUV

2、EC中的穩(wěn)定表達(dá)目的目的：利用靶向人Cav1基因的短發(fā)夾RNA（shRNA）真核表達(dá)質(zhì)粒，轉(zhuǎn)染人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC，并篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆細(xì)胞株。方法方法：針對Cav1基因的mRNA序列設(shè)計并分別構(gòu)建3個以shRNA質(zhì)粒表達(dá)載體（pGPHINeoCav1homo526、pGPHINeoCav1homo548、pGPHINeoCav1homo781）和1個陰性對照質(zhì)粒表達(dá)載體，采用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株HUVEC，G418篩

3、選后，經(jīng)免疫印跡和共聚焦顯微鏡分析HUVECCav1的表達(dá)，選取抑制效應(yīng)最強(qiáng)的一組，構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)Cav1shRNA的HUVEC細(xì)胞株（實驗組）和穩(wěn)定表達(dá)controlshRNA的HUVEC細(xì)胞株（載體對照組）。結(jié)果：結(jié)果：穩(wěn)定表達(dá)Cav1shRNA的HUVEC細(xì)胞株（實驗組）命名為HUVECcav1knowndown，穩(wěn)定表達(dá)controlshRNA的HUVEC細(xì)胞株（載體對照組）命名為HUVECcav1control。質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后檢