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1、目的:探討TAP對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠周圍神經(jīng)和主動(dòng)脈的保護(hù)作用及其機(jī)制。 方法:(1)一次性給大鼠鏈脲佐菌素(STZ)(60mg·kg-1,ip)制作糖尿病大鼠模型,72h后若血糖值≥16.7mM者則納入糖尿病大鼠,造模大鼠按血糖值范圍分為模型組、TAP組(390,195,97.5 mg.kg-1,ig),T組(195 mg·kg-1,ig),P組(195mg·kg-1,ig)和導(dǎo)升明組(100 mg·kg-1,ig),另設(shè)一正常
2、對(duì)照組,連續(xù)灌胃給藥24w。給藥期間每4w檢測(cè)一次血糖、體重,于16w,20w,24w時(shí)用代謝籠檢測(cè)糖尿病大鼠24h飲食、飲水及尿量。(2)給藥24w后,檢測(cè)各組糖尿病大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽還原酶(GStt-Px)含量,血脂、糖化血清蛋白(GSP)、一氧化氮(NO)及尿白蛋白(UALB)水平;(3)給藥24w后,檢測(cè)右側(cè)坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度(NCV),光鏡(HE、甲苯胺籃)觀察坐骨神經(jīng)形態(tài)的改變,并以病
3、理圖像分析軟件計(jì)算髓鞘面積及密度,電鏡觀察坐骨神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)的改變,免疫組化法觀察坐骨神經(jīng)內(nèi)VEGF和NGF的表達(dá)情況,并以病理圖像分析軟件計(jì)算陽性細(xì)胞數(shù)及陽性細(xì)胞強(qiáng)度;(4)給藥24w后,光鏡和電鏡觀察主動(dòng)脈病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)改變,免疫組化法檢測(cè)主動(dòng)脈VEGF蛋白表達(dá)水平,病理圖像分析軟件計(jì)算其陽性細(xì)胞數(shù)及陽性細(xì)胞強(qiáng)度。 結(jié)果:(1)TAP組均能明顯降低糖尿病大鼠血糖、飲食、飲水及尿量,增加體重,與模型組相比有顯著性意義(P<0.
4、05),其中TAP大劑量組效果最明顯;(2)TAP各組均可降低DM大鼠血清MDA、TC、TG、LDL-C及GSP水平,提高血清SOD、GSH-Px、HDL-C、NO水平,以TAP大劑量組效果最好;(3)通過電鏡、電生理、免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)表明TAP有改善坐骨神經(jīng)髓鞘及軸突的損傷,提高坐骨神經(jīng)的傳導(dǎo)速度(NCV)和上調(diào)VEGF及NGF的表達(dá)(P<0.05),其中以大劑量組效果更明顯(P<0.01);(4)TAP對(duì)大血管有明顯保護(hù)作用,光電鏡
5、觀察到模型組內(nèi)皮細(xì)胞有脫落,內(nèi)皮下有平滑肌遷入,中膜平滑肌排列紊亂,而用藥組血管內(nèi)膜平整,內(nèi)皮下間隙小,中膜平滑肌細(xì)胞排列較整齊。免疫組化結(jié)果顯示,血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞的VEGF表達(dá)均減少(P<0.05),其中以TAP大劑量組效果最佳。兩個(gè)單味藥也有一定作用,但效果不及TAP大劑量組。 結(jié)論:1.TAP對(duì)糖尿病大鼠“三多一少”癥狀有明顯改善作用。 2.TAP能明顯降低糖尿病大鼠血糖、改善血脂,提高機(jī)體的抗氧化能力。
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