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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討大黃素是否可能通過PI3K/Akt信號(hào)通路對(duì)高糖環(huán)境下的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)一氧化氮(NO)的影響。
方法:①培養(yǎng)HUVECs,用MTT法篩選大黃素的實(shí)驗(yàn)濃度。②硝酸還原酶法檢測(cè)不同糖濃度下NO分泌,將HUVECs隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NG組,葡萄糖濃度5.5mmol/L),高糖濃度組(HG組,葡萄糖濃度11.1mmol/L,22.2 mmol/L,33.3 mmol/L)。③硝酸還原酶法檢測(cè)高糖33.3m
2、mo/L培養(yǎng)HUVECs不同時(shí)間(0,24,48,72小時(shí))下NO分泌。④高糖33.3mmol/L環(huán)境下培養(yǎng)細(xì)胞48小時(shí),將HUVECs隨機(jī)分為高糖33.3mmol/L度組,高糖33.3mmol/L+大黃素組,高糖33.3mmol/L+LY294002組,高糖33.3mmol/L+大黃素+LY294002組,硝酸還原酶法檢測(cè)各組對(duì)NO分泌的影響⑤應(yīng)用Western blot檢測(cè)各組48h時(shí)p-Akt(Ser473)的表達(dá)。
結(jié)
3、果:①10μmol/L大黃素濃度時(shí) HUVECs生長(zhǎng)良好(p<0.05);②不同糖濃度下,正常對(duì)照組的NO值分別較其他組明顯增加(p<0.05);③高糖33.3mmol/L組培養(yǎng),與0h組相比,24h組NO分泌量增加(p<0.05),48h、72h減少(p<0.05);④高糖33.3mmol/L組,高糖33.3mmol/L+大黃素組,高糖33.3mmol/L+LY294002組,高糖33.3mmol/L+LY294002+大黃素組的NO
4、分泌,高糖33.3mmol/L+LY294002組分別較其他組明顯減少(p<0.05);大黃素可改善LY294002抑制作用,大黃素組的NO值分別較其他組明顯增加(p<0.05);⑤在高糖濃度,大黃素組的p-Akt(Ser473)蛋白灰度值較Control、LY294002組和大黃素+LY294002組均有明顯增加(p<0.05);大黃素+LY294002組中p-Akt(Ser473)蛋白灰度值較LY294002組也有明顯的增加(p<0
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