太原地區(qū)產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌的流行趨勢(shì)和耐藥機(jī)制.pdf

1、目的 分析太原地區(qū)產(chǎn)ESBL大腸埃希菌流行趨勢(shì)和耐藥機(jī)制，為指導(dǎo)臨床合理使用抗生素，減少耐藥菌株在本地區(qū)擴(kuò)散及流行病研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和指導(dǎo)。 方法 1對(duì)臨床分離的耐藥菌株進(jìn)行紙片擴(kuò)散法ESBL表型篩選，將篩選出68株ESBL表型陽(yáng)性菌重新進(jìn)行生化鑒定、藥敏實(shí)驗(yàn)。 2用PCR方法對(duì)產(chǎn)ESBL大腸埃希菌進(jìn)行分型并測(cè)序。 3用三維實(shí)驗(yàn)、多重PCR的方法對(duì)耐頭孢西丁的產(chǎn)ESBL大腸埃希菌進(jìn)行AmpCβ-內(nèi)

2、酰胺酶的檢測(cè)。 4SDS-PAGE對(duì)部分菌株外膜蛋白進(jìn)行分離鑒定。 5ERIC-PCR的方法流行病學(xué)分型。 6PCR方法對(duì)整合酶及其基因盒進(jìn)行分析并測(cè)序。 結(jié)果 1臨床收集耐藥大腸埃希氏菌株中，通過(guò)ESBL表型確證試驗(yàn)共篩選出68株ESBL陽(yáng)性菌株。其中門診病人10株，住院病人58株。其中外科病房分離占2/3。 2PCR結(jié)果TEM型67株為陽(yáng)性，SHV型04LE030陽(yáng)性，測(cè)序?yàn)镾HV12

3、，CTX-M2、OXA1、OXA2、OXA10引物PCR電泳未見(jiàn)陽(yáng)性。CTX-M1陽(yáng)性21株，CTX-M9陽(yáng)性48株。 3AMPC三維實(shí)驗(yàn)04LE030弱陽(yáng)性，多重PCR結(jié)果04LE030陽(yáng)性帶在400BP左右，測(cè)序?yàn)镈HA1。 4SDS-PAGE可見(jiàn)04LE048出現(xiàn)OmpF缺失出現(xiàn)大分子蛋白條帶。 5.ERIC-PCR的方法顯示不同醫(yī)院菌株流行病學(xué)分型有差異。 6整合酶ⅠPCR陽(yáng)性39株，整合酶ⅡPC

4、R陽(yáng)性1株，其基因盒有兩種結(jié)構(gòu)，均包括氨基糖苷類抗生素和磺胺類抗生素的耐藥的基因。 結(jié)論 1產(chǎn)ESBL大腸埃希菌引起的感染以泌尿系統(tǒng)和呼吸道感染為主，住院病人以外科病房為主，門診病人泌尿系統(tǒng)老人多見(jiàn)。 2本地區(qū)產(chǎn)ESBL大腸埃希菌以CTX-M9群、CTX-M1群為主。表型篩選時(shí)可使用頭孢噻肟和氨曲南，確證可只使用頭孢噻肟和頭孢噻肟+棒酸。單頭孢他定和頭孢他定+棒酸表型確證試驗(yàn)陽(yáng)性的大腸高度懷疑為SHV型。