去腎交感神經(jīng)支配術(shù)對心衰犬心功能和重構(gòu)相關(guān)因子影響的研究.pdf

1、目的：
　　本研究采用心肌梗死后心衰犬模型，成模后行去腎交感神經(jīng)支配術(shù)(RSD)觀察BNP、UCG、MMP-2、MMP-9、GAP-43、TH和NGF的變化規(guī)律，探討RSD術(shù)對心衰犬左室功能保護作用的機制。
　　方法：
　　通過明膠海綿冠脈栓塞法制作心肌梗死后心衰犬模型，16只實驗犬隨機分為對照組（control group，C組）和實驗組（組1、2、3），對照組只造模，不消融，MI后8w處死。實驗組于MI4w（心衰成

2、模）時行RSD術(shù)，分別于RSD術(shù)后2w（組1）、3w（組2）和4w（組3）處死取心肌標(biāo)本。ELISA法測血清BNP，Philips CX50便攜式超聲心動儀記錄EF、LVEDV、LVESV、PWT、IVST等超聲指標(biāo)，取心肌梗死區(qū)、梗死周邊區(qū)和正常區(qū)心肌組織，免疫組織化學(xué)染色法檢測MMP-2、MMP-9的表達和分布，Western Blot測定TH和GAP-43的表達，實時定量PCR檢測犬NGF基因的表達。
　　結(jié)果：
　　

3、實驗組和C組BNP測定結(jié)果在基線和成模兩個采血時間點差異無統(tǒng)計學(xué)意義。處死時實驗組BNP顯著低于對照組，組1、組2、組3組間差異顯著，且隨觀察時間的延長而逐漸降低(P＜0.05)。觀察各組UCG指標(biāo)在基線和成模兩個時間點的差異無統(tǒng)計學(xué)意義，PWT和IVST在C組隨時間延長而逐漸增加，實驗組在心梗后4w即心衰成模時，PWT、IVST均較基線值升高顯著，此后PWT、IVST隨著RSD術(shù)后觀察時間的延長而逐漸升高，但升高趨勢逐漸減低(P＜0.

4、05)。在心衰成模時可見C組和實驗組的EF值均較基線顯著降低，C組無干預(yù)措施下8w處死時EF持續(xù)降低至(25.60±2.09)％(P＜0.05)，實驗組隨著RSD術(shù)后時間的延長，EF值逐漸升高，組2和組3處死時BNP測量值較心衰成模時升高有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。MMP-2和MMP-9分布在梗死區(qū)＞梗死周邊區(qū)＞正常心肌區(qū)。MMP-2在栓塞3d后開始升高，在4w達到高峰，然后呈下降趨勢在6w～8w達到穩(wěn)定。MMP-9在栓塞后3d升高不

5、明顯，1w時逐漸升高，在2w達到高峰，此后逐漸緩慢下降，于6W～8W穩(wěn)定。組2、組3與組1、對照組相比，MMP-2和MMP-9表達降低幅度明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。實驗組GAP-43和TH在梗死區(qū)和周邊區(qū)的表達水平均隨著RSD術(shù)后時間的延長而逐漸降低。C組、組1和組2的GAP-43表達在梗死周邊區(qū)均顯著高于梗死區(qū)，組3在兩個區(qū)域GAP-43表達差異不顯著;組2和組3的TH表達在梗死周邊區(qū)顯著高于梗死區(qū)(P＜0.05)。NG

6、F的mRNA表達水平在梗死區(qū)和梗死周邊區(qū)均低于正常區(qū)心肌，隨著RSD術(shù)后時間的延長，在梗死區(qū)和梗死周邊區(qū)逐漸增加，且梗死區(qū)增加趨勢高于梗死周邊區(qū)（組3P＜0.01）。
　　結(jié)論：
　　1.采用明膠海綿冠脈栓塞法建立犬心肌梗死后心衰模型，具有創(chuàng)傷小、造價低廉、動物存活率高、生存期長、可重復(fù)性佳等優(yōu)點。
　　2.通過測量左室大小、射血功能等超聲指標(biāo)，結(jié)合血清BNP結(jié)果，可以認為RSD術(shù)對心梗后心衰犬的左室功能隨著時間的延長

7、具有顯著的保護作用。
　　3.檢測MMP-2和MMP-9在心肌不同區(qū)域的分布為梗死區(qū)＞梗死周邊區(qū)＞正常心肌區(qū)。RSD術(shù)對梗死區(qū)和梗死周邊區(qū)的MMP-2和MMP-9表現(xiàn)出抑制作用，隨術(shù)后觀察時間的延長，抑制作用更明顯。
　　4.實驗組GAP-43和TH在梗死區(qū)和梗死周邊區(qū)的蛋白表達隨著RSD術(shù)后時間的延長而逐漸下降，且在梗死周邊區(qū)的表達高于梗死區(qū)，說明新生神經(jīng)纖維分布以梗死周邊區(qū)為主。
　　5.實驗組梗死區(qū)和梗死周邊區(qū)N