瑞舒伐他汀后處理聯(lián)合缺血后處理減輕2型糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注損傷.pdf

1、背景：急性心肌梗死之后的再灌注治療可引起心肌缺血/再灌注損傷。缺血后處理是減輕心肌缺血/再灌注損傷的有效方法。某些藥物能在缺血后、再灌注前通過模擬內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制發(fā)揮與缺血后處理相似的保護(hù)作用，被稱之為藥物后處理。但是，近年來研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病或高血糖可削弱缺血后處理或藥物后處理的心肌保護(hù)作用，極大地限制了缺血后處理及藥物后處理的臨床應(yīng)用。
　　 目的：本研究旨在探討：(1)建立一種更加接近臨床實際的2型糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注模

2、型；(2)探討瑞舒伐他汀后處理聯(lián)合缺血后處理能否減輕2型糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注損傷，及其可能的機(jī)制。
　　 方法：(1)Wistar大鼠隨機(jī)分為2組(n=24)：正常對照組，腹腔注射10％尼克酰胺(NA)(230mg/kg)，15min后尾靜脈注射檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液(6.5ml/kg)；2型糖尿病組，腹腔注射10％NA(230mg/kg)，15min后尾靜脈注射1％鏈脲佐菌素(STZ)(65mg/kg)。注射完畢普通飼料

3、喂養(yǎng)，監(jiān)測體重及空腹血糖水平。9周后成模2型糖尿病大鼠給予麻醉、開胸，結(jié)扎左主冠狀動脈(LCA)30min，之后持續(xù)再灌注120min，隨機(jī)分為2組(n=12)：2型糖尿病假手術(shù)組，冠脈只穿線不結(jié)扎；2型糖尿病缺血/再灌注組，未予其他處理。全自動生化分析儀檢測甘油三酯、總膽固醇。TTC法檢測心肌梗死面積。電鏡觀察心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。(2)2型糖尿病Wistar大鼠給予結(jié)扎LCA30min，之后持續(xù)再灌注120min，隨機(jī)分為6組(n=10

4、)：假手術(shù)組，冠脈只穿線不結(jié)扎；缺血/再灌注對照組，未予其他處理；缺血后處理組，再灌注前給予10 s R/10 sl，重復(fù)3次；瑞舒伐他汀后處理組，瑞舒伐他汀5mg/kg，再灌注前3分鐘頸外靜脈緩慢推注；瑞舒伐他汀后處理+缺血后處理組，瑞舒伐他汀5mg/kg，再灌注前3分鐘頸外靜脈緩慢推注，再灌注前同時予10 s R/10 s l，重復(fù)3次；瑞舒伐他汀后處理+缺血后處理+LY294002組，再灌注前15分鐘經(jīng)頸外靜脈給予0.3mg/kg

5、 LY294002緩慢推注，再灌注前3分鐘瑞舒伐他汀5mg/kg頸外靜脈緩慢推注，再灌注前予10s R/10sl，重復(fù)3次。TTC染色測定心肌梗死面積、電鏡觀察心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化、Western-blot法測定心肌組織磷酸化AKT蛋白、總AKT蛋白、磷酸化eNOS蛋白及總eNOS蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果：(1)與正常對照組相比，2型糖尿病組血甘油三酯增高(1.46±0.19mmol/L vs.0.73±0.11 mmol/L，

6、p＜0.05)，膽固醇增高(1.93±0.12mmol/L vs.1.51±0.10 mmol/L，p＜0.05)，空腹血糖明顯升高(148.05±4.13mg/dl vs.117.04±2.87 mg/dl，p＜0.05)，而體重未見明顯下降(320.22±9.11gvs.319.83±9.00g，p=0.88)。與2型糖尿病假于術(shù)組相比，2型糖尿病缺血/再灌注組線粒體評分更高(3.51±0.23 vs.0.00±0.00，p＜0.0

7、1)，心肌梗死面積顯著增高{(70±5)％vs.(0±0)％，p＜0.01}。(2)相對缺血/再灌注對照組，瑞舒伐他汀后處理組、缺血后處理組、瑞舒伐他汀后處理+缺血后處理組能激活PI3K通路誘導(dǎo)AKT、eNOS磷酸化增加(p＜0.05)，減輕心肌超微結(jié)構(gòu)損傷(p＜0.01)，減小心肌梗死區(qū)面積(p＜0.01)。相對瑞舒伐他汀后處理組及缺血后處理組，瑞舒伐他汀后處理+缺血后處理組能進(jìn)一步激活PI3K通路誘導(dǎo)AKT、eNOS磷酸化增加(p＜

8、0.05)，減輕心肌超微結(jié)構(gòu)損傷(1.15±0.32 vs.2.42±0.22，2.35±0.25，p＜0.01)，減小心肌梗死區(qū)面積{(33±2)％vs.(46±2)％，(48±2)％，p＜0.05}。PI3K抑制劑LY294002則能完全阻斷瑞舒伐他汀后處理+缺血后處理誘導(dǎo)的磷酸化AKT及eNOS表達(dá)增加，使瑞舒伐他汀后處理+缺血后處理喪失對再灌注心肌的保護(hù)作用。
　　 結(jié)論：(1)通過腹腔注射尼克酰胺(NA)230mg/k