GSK3β磷酸化介導阿托伐他汀鈣后處理減輕鏈脲佐菌素誘導的2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷.pdf

1、背景：糖尿病患者日漸增多，且糖尿病是心血管疾病的等危癥，大量流行病學研究及臨床試驗的結(jié)果顯示，糖尿病時心肌對缺血及再灌注損傷更敏感，而對常規(guī)的保護措施，如缺血預處理、缺血后處理及藥物后處理等表現(xiàn)出一定的抵抗。探索如何減輕糖尿病心肌缺血再灌注損傷是心血管領(lǐng)域近年來研究的熱點。
　　目的：（1）建立較為理想而穩(wěn)定的SD大鼠2型糖尿病模型；（2）觀察阿托伐他汀鈣后處理對糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注損傷的作用及不同處理組大鼠體內(nèi)GSK3β磷

2、酸化情況，探討阿托伐他汀鈣后處理對糖尿病大鼠心肌保護作用的部分機制。
　　方法：（1）健康雄性 SD大鼠予高脂高糖飼料喂養(yǎng)后，腹腔注射1％S TZ，定期監(jiān)測體重和血糖，并檢測血清甘油三酯、總膽固醇；（2）將糖尿病大鼠隨機分為6組：①假手術(shù)組；②缺血再灌注組；③TDZD-8+2mg/kg阿托伐他汀鈣組；④1mg/kg阿托伐他汀鈣后處理組；⑤2mg/kg阿托伐他汀鈣后處理組；⑥D(zhuǎn)MSO組；假手術(shù)組只穿線不結(jié)扎左前降支，余5組均結(jié)扎左前

3、降支，予心肌缺血40 min，再灌注180 min處理，干預藥物于再灌注前注入。同周齡非糖尿病大鼠隨機分為2組：①假手術(shù)組；②缺血再灌注組。ELISA試劑盒測定血清cTnI、HSP70；Eva ns Blue–TTC染色法顯示心肌缺血、梗死范圍；HE染色法觀察心肌組織形態(tài)學變化；免疫組化法顯示p-GSK3β的分布情況；Western blot法測定心肌組織GSK3β，p-GSK3β，HSF-1的表達。
　　結(jié)果：（1）2型糖尿病大

4、鼠空腹血糖增高（注射STZ后1-4周均P<0.05），血甘油三酯、膽固醇增高（注射STZ后4周第P<0.05）；其體重在注射STZ后1-3周與非糖尿病大鼠相比未見明顯下降（均P>0.05），在注射后第4周體重較非糖尿病大鼠略輕（P<0.05）。（2）①糖尿病組與非糖尿病組心肌缺血范圍及梗死范圍差別無統(tǒng)計學意義（P>0.05），但HE染色顯示糖尿病組病變較重、cTnI值較高、GSK3β活性較高、而p-GSK3β較低（以上均P<0.05）；

5、②與I/R組相比，不同劑量阿托伐他汀鈣后處理組及 TDZD-8+2 mg/k g阿托伐他汀鈣組血清cTnI減低、心肌梗死范圍減小、形態(tài)學病變減輕、p-GSK3β增多（以上均P<0.05）；③相對于阿托伐他汀鈣后處理1 mg/kg組，2mg/kg組能進一步減低血清cTnI值、減小心肌梗死面積范圍、減輕形態(tài)學病變、增加p-GSK3β含量（以上均P<0.05）；④與TDZD-8+2mg/k阿托伐他汀鈣組相比，2mg/kg阿托伐他汀鈣后處理組血

6、清cTnI值、心肌梗死范圍、形態(tài)學病變、GSK3β的磷酸化水平與其差異無統(tǒng)計學意義（以上均 P>0.05）；⑤心肌細胞內(nèi)HSF-1表達水平及血清HSP70的水平與心肌細胞中p-GSK3β變化一致；⑥免疫組化法檢測心肌細胞p-GSK3β提示p-GSK3β在細胞核及細胞質(zhì)均有分布。
　　結(jié)論：（1）采用高脂高糖喂養(yǎng)飼料聯(lián)合腹腔注射鏈脲佐菌素的方法能夠誘導出較為穩(wěn)定的SD大鼠2型糖尿病模型。（2）①本實驗所用糖尿病大鼠模型對心肌缺血再灌