應(yīng)用EMD進(jìn)行重建的牙周組織對(duì)正畸力的應(yīng)答及其機(jī)理的研究.pdf

1、近年來，隨成人正畸患者的增加，臨床中牙根暴露、牙槽骨吸收等牙周組織喪失的病人越來越多。牙周組織是正畸牙移動(dòng)的基礎(chǔ)，關(guān)系到矯治后牙列的平衡、功能和美觀。因此，如何為此類患者提供一種安全有效的治療方法，提高矯治質(zhì)量，已成為正畸醫(yī)生日趨關(guān)注的問題。 常規(guī)正畸時(shí)，對(duì)于健康牙周，適當(dāng)?shù)臋C(jī)械刺激能改變細(xì)胞的形態(tài)，促進(jìn)細(xì)胞的增殖分化以及功能的維持，牙周改建可處于動(dòng)態(tài)平衡。對(duì)于有牙周組織喪失的患者，目前國(guó)內(nèi)外牙周領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)是應(yīng)用釉基質(zhì)蛋白衍

2、生物(EnamelMatrix DerivafiveENID)進(jìn)行牙周重建。其在歐洲、美國(guó)和日本的臨床應(yīng)用已顯示取得了較好的療效。但是應(yīng)用EMD進(jìn)行牙周重建術(shù)后能否接受正畸治療，牙移動(dòng)過程中其牙周組織的組織改建過程與正常牙周組織有無區(qū)別等這些與正畸臨床密切相關(guān)的問題，目前國(guó)內(nèi)外相關(guān)報(bào)道非常少。 本實(shí)驗(yàn)以國(guó)際公認(rèn)的beagle犬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，通過建立牙周組織喪失的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，首次探索了在?yīng)用EMD進(jìn)行牙周重建術(shù)后，模擬正畸臨床加力

3、周期，觀察不同時(shí)間點(diǎn)牙周組織的變化。從組織形態(tài)學(xué)觀察到蛋白、基因表達(dá)水平，應(yīng)用免疫組織化學(xué)(1mmunohistochemistry IHC)，原位雜交(In situ hibridization ISH)技術(shù)等方法比較EMD重建的牙周組織中與骨改建密切相關(guān)的因子骨保護(hù)素(osteoprotegerin OPG)，破骨細(xì)胞分化因子(osteoclast differentiation factor ODF／RANKL)及核心結(jié)合因子(c

4、orebinding factor Cbfal)的分布變化規(guī)律與正常的牙周組織有無區(qū)別。從骨形成和骨吸收兩方面為牙周組織喪失的患者應(yīng)用EMD進(jìn)行牙周重建后能否進(jìn)行正畸牙移動(dòng)提供初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為重建牙周組織及后續(xù)成人正畸機(jī)理的系列深入研究奠定基礎(chǔ)并且提供一定的研究方向。 結(jié)果顯示： 1．通過外科手術(shù)方法成功建立了牙周組織喪失的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。應(yīng)用 EMDl2周后，根據(jù)x線片、組織形態(tài)學(xué)檢查，發(fā)現(xiàn)應(yīng)用EMD組新生 牙槽骨

5、骨量大于對(duì)照組。 2．在正畸力作用下，EMD重建的牙周組織形態(tài)學(xué)變化與正常牙周相比未 見明顯的區(qū)別。 3．初次加力后的第一周，調(diào)控骨形成的關(guān)鍵性因子Cbfal蛋白在實(shí)驗(yàn)組 的表達(dá)強(qiáng)于手術(shù)對(duì)照組和非手術(shù)對(duì)照組。此后不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)變化 規(guī)律三個(gè)組問無明顯的區(qū)別。實(shí)驗(yàn)組、手術(shù)對(duì)照組和非手術(shù)對(duì)照組均 在牙周膜成纖維細(xì)胞、成骨細(xì)胞、成牙骨質(zhì)細(xì)胞、間充質(zhì)細(xì)胞和破骨 細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)Cbfal蛋白的陽性表達(dá)。不同的時(shí)間點(diǎn)，其分布

6、呈現(xiàn)一定 的空間特異性。 4．初次加力后的第一周，破骨細(xì)胞的分化因子RANKL蛋白和mRNA在 實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)低于手術(shù)對(duì)照組和非手術(shù)對(duì)照組。此后三個(gè)組不同時(shí)間 點(diǎn)的表達(dá)變化規(guī)律無明顯的區(qū)別。三個(gè)組的牙周膜成纖維細(xì)胞、成骨 細(xì)胞、成牙骨質(zhì)細(xì)胞、骨細(xì)胞、間充質(zhì)細(xì)胞和破骨細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)RANKL_ 蛋白和mRNA的陽性信號(hào)。具有時(shí)間和空間分布的特異性。 5．初次加力后的第一周，破骨細(xì)胞抑制因子OPG蛋白和mRNA在實(shí)

7、驗(yàn) 組部分骨小梁邊緣的骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞有表達(dá)，而手術(shù)對(duì)照組和非手 術(shù)對(duì)照組未見明顯表達(dá)。此后三個(gè)組的分布變化規(guī)律類似。OPG蛋白和mRNA的陽性信號(hào)均可在三個(gè)組的牙周膜成纖維細(xì)胞，成骨細(xì)胞， 成牙骨質(zhì)細(xì)胞、骨細(xì)胞、間充質(zhì)細(xì)胞和破骨細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)。隨時(shí)間的變 化，存在一定的空間分布規(guī)律。 本研究結(jié)論： 1．應(yīng)用EMD重建的牙周組織新生的牙槽骨的骨量大于對(duì)照組。 2．從組織形態(tài)學(xué)和調(diào)控骨改建的關(guān)鍵性因子的變化規(guī)律

8、提示應(yīng)用EMD 重建的牙周組織可以進(jìn)行正畸牙移動(dòng)。 3．根據(jù)Cbfal蛋白、RANKL蛋白和mRNA、OPG蛋白和mRNA在初次加力后的第一周的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)應(yīng)用EMD重建的牙周組織具有一定的抵抗骨吸收的能力。而在其它的時(shí)間段，應(yīng)用EMD組的骨組織改建活動(dòng)與非手術(shù)對(duì)照組和手術(shù)對(duì)照組未見明顯的差別。 4．實(shí)驗(yàn)組Cbfal蛋白、RANKL蛋白和mRNA、OPG蛋白和mRNA在破骨細(xì)胞的陽性表達(dá)，充分證明了牙移動(dòng)過程中，應(yīng)用

9、EMD重建牙周組織的破骨細(xì)胞也可以產(chǎn)生一定的RANKL和OPG,其骨吸收和骨形成活動(dòng)同樣處于一種動(dòng)態(tài)的平衡，是骨改建活動(dòng)相互關(guān)聯(lián)、密不可分的兩個(gè)部分。 5．正畸力作用下，調(diào)控骨改建的關(guān)鍵因子Cbfal、RANKL和OPG在實(shí) 驗(yàn)組表達(dá)變化規(guī)律與手術(shù)對(duì)照組和非手術(shù)對(duì)照組類似，證明Cbfal、RANKL和OPG在EMD重建牙周組織的成骨和破骨活動(dòng)中同樣發(fā)揮了重要的調(diào)控作用。 綜上所述，EMD作為一種有應(yīng)用前景的生物制劑，為臨