VEGF對(duì)大鼠正畸牙牙周組織改建的影響.pdf

1、隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和生活水平的提高，人們對(duì)美的要求也越來(lái)越高，同時(shí)錯(cuò)牙合畸形的危害也漸漸受到重視，渴望矯治的患者也在與日俱增，尤其是成年人?？谇徽麑W(xué)的發(fā)展一定程度上解決了錯(cuò)牙合畸形造成的口頜系統(tǒng)的形態(tài)和功能異常，滿足了人們對(duì)美的追求，但是由于正畸矯治時(shí)間較長(zhǎng)或難度較大，許多患者往往不能堅(jiān)持而放棄治療，國(guó)內(nèi)外學(xué)者為此作了許多相關(guān)研究。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是一類

2、促進(jìn)血管形成的細(xì)胞因子，具有廣泛的生物學(xué)作用，可調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的分化及功能活性，與骨改建過(guò)程關(guān)系密切。近年來(lái)應(yīng)用細(xì)胞因子作用于牙周功能細(xì)胞控制正畸牙齒移動(dòng)，促進(jìn)牙周組織改建，有研究表明，VEGF、整合素均參與了正畸牙牙周組織的改建；但有關(guān)二者在正畸牙牙周組織改建中的相互調(diào)節(jié)作用目前未見(jiàn)報(bào)道。 目的：觀察不同濃度的重組人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(recombinant human vasoularendothelial growt

3、h factor,rhVEGFi)和重組鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體(recombinant ratvasoular endothelial growth factor antibody,rranti—VEGF)對(duì)SD大鼠正畸牙牙周組織中整合素αv、β3(integrin alpha<,v>,beta<,3>)表達(dá)的影響，探討VEGF與整合素在牙周組織改建中的相互作用機(jī)制，為正畸臨床矯治提供相應(yīng)的理論依據(jù)。 方法，在SD大鼠左側(cè)上頜第

4、一磨牙與上切牙之間安放正畸裝置，施力50g，建立大鼠上頜磨牙向近中移動(dòng)的動(dòng)物模型。將55只模型大鼠按注射的藥物不同隨機(jī)分為VEGF、anti-VEGF抗體和對(duì)照組三大組，分別為25只、25只、5只。其中VEGF組和anti-VEGF抗體組又根據(jù)注射藥物濃度不同各自分為0.1、0.5、1、1.5、2μg/ml和0.1、0.5、1、5、10μg/ml 5個(gè)亞組，分別在加力后的每隔兩天在左側(cè)上頜第一磨牙頰側(cè)牙齦粘膜下0.1、0.5、1、1.5

5、、2μg/ml濃度的rhVEGF0.1ml，anti-VEGF抗體組中的5小組，分別在加力后的每日在相同部位注射0.1，0.5、1、5、10μg/ml濃度的rranti-VEGF抗體0.1ml，對(duì)照組注射等量的滅菌磷酸鹽緩沖鹽水(Phosphate-buffered saline,PBS)。第十天處死大鼠。分別于實(shí)驗(yàn)前后稱量大鼠體重并取正畸牙模型，在石膏模型上測(cè)量第一與第二磨牙兩牙的近中舌側(cè)溝間的距離。取左上頜第一磨牙及其牙周組織進(jìn)行眥

6、染色行組織學(xué)觀察和破骨細(xì)胞計(jì)數(shù)，用免疫組織化學(xué)和原位雜交方法觀測(cè)整合素αv、β3在牙周組織功能細(xì)胞中的表達(dá)變化。 結(jié)果： 1．VEGF組：①牙齒移動(dòng)距離測(cè)量：與對(duì)照組比較，各組牙齒移動(dòng)距離都大于對(duì)照組，且濃度低于0.5μg/ml時(shí)移動(dòng)距離隨VEGF濃度增高而增大，0.5μg/ml組達(dá)到最大值，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，當(dāng)濃度大于0.5μg/ml時(shí)移動(dòng)距離隨VEGF濃度增高而減少，其他四組均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.0

7、5)：②組織學(xué)改變及破骨細(xì)胞計(jì)數(shù)：與對(duì)照組比較，各濃度組壓力側(cè)破骨細(xì)胞都增多，以0.5μg/ml組最多，并且0.5μg/ml、1μg/ml和1.5μg/ml組其增加都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，牙周的骨組織以吸收為主：0.1μg/ml、2μg/ml組的破骨細(xì)胞比對(duì)照組多，0.1μg/ml組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而2陷，ml組增加不明顯(P>0.05)；③整合素表達(dá)：整合素αv、β3隨VEGF濃度增大呈拋物線形表達(dá)，當(dāng)VEGF為

8、1μg/ml時(shí)整合素αv、β3的表達(dá)到達(dá)峰值，比其表達(dá)值增高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。VEGF濃度低于1μg/ml時(shí)整合素αv、β3的表達(dá)隨VEGF濃度的增大而增強(qiáng)，當(dāng)VEGF濃度高于1μg/ml時(shí)，整合素αv、β3的表達(dá)隨VEGF濃度的增大而減弱。④各組動(dòng)物處死時(shí)體重均比實(shí)驗(yàn)前輕，但各組間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2．a(chǎn)nti-VgGF抗體組：①牙齒移動(dòng)距離測(cè)量：與對(duì)照組比較，1μg/ml組的移動(dòng)距離最小，當(dāng)an

9、ti-VEGF抗體濃度低于1μg/ml時(shí)，牙齒移動(dòng)距離隨anti-VEGF抗體濃度增高而減少，當(dāng)anti-VEGF抗體濃度高于1μg/ml時(shí)，牙齒移動(dòng)距離隨anti-VEGF抗體濃度增高而增大，各組移動(dòng)距離都比對(duì)照組小，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。②組織學(xué)改變及破骨細(xì)胞計(jì)數(shù)：1μg/ml組壓力側(cè)的破骨細(xì)胞最少，與對(duì)照組比較P<0.01，提示牙周骨組織的吸收受到明顯抑制：其他各小組的減少都無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。③整合素表達(dá)：牙周

10、組織整合素αv、β3的表達(dá)隨anti-VEGF抗體濃度增加也呈拋物線狀，0.5μg/ml組為最低值，與對(duì)照組相比顯著減小(P<0.01)。在濃度小于0.5μg/ml的anti-VEGF抗體作用下，整合素旺αv、β3的表達(dá)隨anti-VEGF抗體濃度的增大而減弱，當(dāng)anti-VEGF抗體濃度大于0.5μg/ml時(shí)，整合素αv、β3的表達(dá)隨anti-VEGF抗體濃度的增大而增強(qiáng)，在張力側(cè)組織表達(dá)比壓力側(cè)稍弱。④各組動(dòng)物處死時(shí)體重均比實(shí)驗(yàn)前輕

11、，但各組間其差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論：①在局部外源性VEGF調(diào)節(jié)下整合素αv、β3在牙周組織中的表達(dá)增強(qiáng)，同時(shí)因anti-VEGF抗體能阻斷了VEGF作用，使整合素αv、β3在牙周組織中表達(dá)減弱。其表達(dá)強(qiáng)弱都隨VEGF和anti-VEGF抗體注射濃度變化而改變。②在VEGF作用下正畸牙牙槽骨骨組織以吸收為主，牙齒移動(dòng)較快；而anti-VEGF抗體的作用是抑制骨吸收，牙齒移動(dòng)減慢。③局部短時(shí)間內(nèi)應(yīng)用外源性VEGF和