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1、在正畸治療中移動(dòng)牙齒的同時(shí)可能引起一定程度的牙根吸收,目前認(rèn)為其主要原因是由于矯治力過(guò)大,而基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)可能在牙根吸收這個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮重要作用,其中MMP-1是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中最重要的成員之一,屬于膠原酶,被認(rèn)為是破壞牙周膜組織的主要介質(zhì)。MMPs在體內(nèi)的調(diào)節(jié)處于一種微妙的平衡狀態(tài),其功能受基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子(tiSSue inhibitors of m
2、etalloproteinases,TIMPs)的調(diào)控。TIMP-1是廣泛表達(dá)于細(xì)胞中的可溶性糖蛋白,主要通過(guò)抑制MMP-1的活性來(lái)促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)的過(guò)量沉積。ECM的正常生理代謝依賴(lài)于MMPs及TIMPs兩者之間的動(dòng)態(tài)平衡,其中機(jī)體內(nèi)MMP-1/TIMP-1的平衡關(guān)系對(duì)穩(wěn)定細(xì)胞外基質(zhì)起關(guān)鍵作用。 為進(jìn)一步了解正畸力值與牙根吸收的關(guān)系,研究牙根吸收時(shí)MMPs在牙周組織中的分布情況
3、和表達(dá)水平,探討MMP-1、TIMP-1在牙根吸收發(fā)生發(fā)展及牙根組織破壞過(guò)程中的作用,本研究采用小型豬建立正畸牙根吸收動(dòng)物模型,對(duì)小型豬下頜乳側(cè)切牙施加不同力值,觀察受力后牙根吸收情況,研究不同力值對(duì)小型豬牙根損害程度的影響,為進(jìn)一步的臨床實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ),為臨床正畸力的使用提供依據(jù);同時(shí)應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)小型豬下頜乳側(cè)切牙牙根吸收過(guò)程中,MMP-1及TIMP-1在根吸收區(qū)牙周組織中的表達(dá),初步探討二者在根吸收過(guò)程中的分子生物學(xué)機(jī)制。本實(shí)
4、驗(yàn)研究分為兩個(gè)部分: 第一章不同力值對(duì)小型豬牙根吸收影響的實(shí)驗(yàn)研究目的:建立小型豬正畸牙根吸收動(dòng)物模型,觀察對(duì)小型豬下頜乳側(cè)切牙施加不同力值后的牙根吸收情況,研究不同力值對(duì)小型豬牙根損害程度的影響,為正畸臨床實(shí)踐中預(yù)防牙根吸收提供參考。 材料與方法:選用北京農(nóng)業(yè)大學(xué)提供的6只中國(guó)實(shí)驗(yàn)用小型豬,5~7月齡,體質(zhì)量12~16kg(平均體質(zhì)量13.2kg),共12顆下頜乳側(cè)切牙,隨機(jī)分為四組,分別施加力值0、100、200、3
5、00g,每2周加力1次,術(shù)后45天切取標(biāo)本,連續(xù)切片后HE染色,行普通光學(xué)顯微鏡形態(tài)觀察和圖像處理分析,并對(duì)牙根吸收指數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,統(tǒng)計(jì)方法采用裂區(qū)設(shè)計(jì)的方差分析。 結(jié)果: 0、100、200g組均未見(jiàn)明顯的牙根吸收,也無(wú)可辨認(rèn)的牙根長(zhǎng)度變化;300g組可見(jiàn)明顯的牙根尖周吸收,牙根變短。 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)研究建立了可靠的正畸牙根吸收動(dòng)物模型,并發(fā)現(xiàn)小型豬牙根吸收程度隨加載力值的增大而加重。 第二章基質(zhì)金屬蛋白酶-
6、1及其抑制劑在小型豬牙根吸收中的表達(dá)目的:建立小型豬正畸牙根吸收動(dòng)物模型后,檢測(cè)牙周組織中基質(zhì)金屬蛋白酶一1及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑~1的分布、表達(dá)及變化,初步研究刪mmp-1、TIMP-1在牙根吸收過(guò)程中的分子生物學(xué)機(jī)制,探討二者在牙根吸收發(fā)生發(fā)展及牙根組織破壞過(guò)程中的作用,為牙根吸收的系統(tǒng)研究和正畸臨床中牙根吸收的預(yù)防奠定基礎(chǔ)。材料與方法:選用北京農(nóng)業(yè)大學(xué)提供的6只中國(guó)實(shí)驗(yàn)用小型豬,5~7月齡,體質(zhì)量12~16kg(平均體質(zhì)量13.2
7、kg),共12顆下頜乳側(cè)切牙,隨機(jī)分為四組,分別施加力值0、100、200、300g,每2周加力1次,術(shù)后45天切取標(biāo)本,應(yīng)用SABC免疫組化技術(shù)觀察MMP-1及TIMP-1在根吸收區(qū)牙周組織中的定位表達(dá),應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法t檢驗(yàn)和方差分析對(duì)MMP-1及TIMP-1在各實(shí)驗(yàn)組根吸收區(qū)牙周組織及正常牙周組織中表達(dá)的差異進(jìn)行比較。 結(jié)果:在正常牙周組織中,MMP-1主要表達(dá)于牙周膜成纖維細(xì)胞、破牙骨質(zhì)細(xì)胞及血管壁內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中,而T
8、IMP-1主要在牙周膜成纖維細(xì)胞、成牙骨質(zhì)細(xì)胞及成骨細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中表達(dá);100g、200g與300g組MMP-1陽(yáng)性染色均比0g組強(qiáng)(P<0.05),100g與200g組TIMP-1陽(yáng)性染色均比0g組增強(qiáng)(P<0.05),而300g組與Og組TIMP-1陽(yáng)性染色無(wú)差異(P=0.63>0.05)。 結(jié)論:MMP-1與TIMP-1參與細(xì)胞外基質(zhì)的代謝活動(dòng),正畸治療牙移動(dòng)過(guò)程中牙周組織的正常改建依賴(lài)于兩者之間的動(dòng)態(tài)平衡;MMP-1是牙
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