小鼠慢性應(yīng)激模型海馬中tau蛋白磷酸化及其對線粒體軸漿運(yùn)輸?shù)挠绊?pdf

1、Tau蛋白是一種微管相關(guān)蛋白,其磷酸化受到嚴(yán)格調(diào)控,在神經(jīng)元中和軸漿運(yùn)輸密切相關(guān)。據(jù)研究報道,急性應(yīng)激中,嚙齒類動物海馬中tau蛋白的磷酸化和下丘腦-垂體-腎上腺(Hypothalamo-Pimitary-Adrenal,HPA)軸的過度激活密切相關(guān)。而在抑郁病人中,HPA軸的過度激活是基本的特征之一。因此,在抑郁癥中,tau蛋白的磷酸化情況以及和軸漿運(yùn)輸?shù)年P(guān)系需要進(jìn)一步研究。我們的假設(shè)是:在慢性應(yīng)激模型中,HPA軸的過度激活會引起ta

2、u蛋白的過度磷酸化并進(jìn)一步影響到軸漿運(yùn)輸。
　　 為驗(yàn)證該假設(shè),我們首先建立了母子剝奪慢性應(yīng)激模型,對其進(jìn)行了行為學(xué)測試,并檢測了HPA軸活性。然后檢測了海馬中tau蛋白的磷酸化水平。為了研究軸漿運(yùn)輸?shù)淖兓?我們檢測了海馬突觸體中線粒體水平的變化。結(jié)合CRH(Corticotropin-Releasing Hormone,CRH)受體1(CRH Receptor1,CRHR1)和糖皮質(zhì)激素受體(Glucocorticoid Re

3、ceptor,GR)的拮抗劑,研究了CRH直接的中樞作用機(jī)制和HPA軸的反饋機(jī)制在tau蛋白磷酸化和線粒體運(yùn)輸中的作用。為了進(jìn)一步檢測tau蛋白磷酸化和線粒體運(yùn)輸?shù)年P(guān)系,我們用實(shí)時成像技術(shù),觀察當(dāng)原代神經(jīng)元中tau蛋白磷酸化水平發(fā)生變化時線粒體運(yùn)輸?shù)膭討B(tài)變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn):
　　 1.母子剝奪慢性應(yīng)激模型具有典型的抑郁/焦慮樣行為和過度激活的HPA軸。
　　 在曠場、糖水偏好和明暗箱行為學(xué)測試中,抑郁模型具有典型的抑郁/焦慮

4、樣行為。和對照組相比,模型組小鼠具有顯著升高的血漿cortitosterone和下丘腦CRH mRNA水平。
　　 2.抑郁模型海馬中tau蛋白的磷酸化水平顯著升高。
　　 和對照組相比,抑郁鼠的海馬中tau蛋白的總表達(dá)水平?jīng)]有顯著變化,但在在AT-8磷酸化位點(diǎn)顯著升高,在tau-1非磷酸化位點(diǎn)顯著降低。
　　 3.抑郁模型海馬突觸體中的線粒體水平顯著升高。
　　 和對照組相比,抑郁模型海馬突觸體中的線粒

5、體水平顯著升高。
　　 4.CRHR1而不是GR介導(dǎo)了tau蛋白的磷酸化水平升高和突觸體中線粒體水平的升高。
　　 CRHR1的拮抗劑CP154526能顯著降低tau蛋白的磷酸化,并能恢復(fù)突觸體中線粒體的水平,而GR的拮抗劑RU486卻沒有這些作用。
　　 5.在原代神經(jīng)元中,當(dāng)tau蛋白磷酸化水平降低時,線粒體的軸漿運(yùn)輸水平下調(diào)。
　　 我們用鋰鹽抑制Gsk3beta的活性從而降低原代神經(jīng)元中tau蛋白