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文檔簡介
1、目的:探討ARC蛋白在AIP后處理大鼠缺血心肌中的表達(dá)及意義。 方法:將32只Wistar大鼠隨機(jī)分成四組(n=8):對照組(Con組),缺血再灌注組(I/R組),AIP后處理組(ATP-Post組),反義寡核苷酸+ATP后處理組(AS+Post組)。Con組:麻醉大鼠,開胸取左心室肌作為缺血前對照。I/R組:建立離體鼠心Langendorff-Neely灌注模型,穩(wěn)定30min后,灌注4℃STH-2心臟停搏液,停搏心臟并低溫維
2、持30min,復(fù)灌并穩(wěn)定60 min后,取左心室肌標(biāo)本。ATP-Post組:方法同I/R組,僅于再灌注初期給予ATP(4mg/kg)灌注。AS+Post組:經(jīng)大鼠尾靜脈注射反義寡核苷酸(5mol/L),其它操作同ATP-Post組。 收集各組大鼠左心室心肌標(biāo)本,應(yīng)用Western blot方法檢測各組心肌組織中ARC和心肌胞漿內(nèi)細(xì)胞色素C表達(dá)量的變化,應(yīng)用TUNEL法檢測各組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)。 結(jié)果: Weste
3、rn blot法檢測到心肌組織中ARC的相對蛋白含量分別為:Con組243.11±8.57%,I/R組76.26±2.71%,ATP-Post組218.59±7.43%和AS+Post組42.52±1.90%;胞漿中細(xì)胞色素C的相對蛋白含量分別為:Con組1.30±0.11%,I/R組46.67±3.92%,ATP-Post組28.73±2.46%和AS+Post組45.52±3.83%,提示ARC蛋白在缺血再灌注后心肌組織中的表達(dá)較C
4、on組明顯減少,在ATP后處理組的表達(dá)量較I/R組明顯增多,而在AS+Post組中表達(dá)較ATP-Post組明顯減少(P<0.05);胞漿細(xì)胞色素C在缺血再灌注后心肌胞漿中的表達(dá)較Con組明顯增多,在ATP后處理組的表達(dá)量較I/R組明顯減少,而在AS+Post組中表達(dá)較ATP-Post組明顯增多(P<0.05)。ARC蛋白表達(dá)與胞漿中細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.768,P<0.05)。 Con組、I/R組、ATP-Po
5、st組和AS+Post組的心肌細(xì)胞AI分別是4.88±0.41%,18.46±1.55%,6.78±0.57%和16.78±1.41%,提示缺血再灌注后的心肌細(xì)胞AI較缺血前明顯增加(P<0.05);ATP-POST組心肌細(xì)胞AI較I/R組明顯減少(P<0.05);而加用ARC抑制劑反義寡核苷酸處理后的心肌細(xì)胞AI較ATP-Post組明顯增加(P<0.05)。ARC蛋白表達(dá)與AI的變化成負(fù)相關(guān)(r=-0.908,P<0.05)。
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