缺血后處理對(duì)離體大鼠心肌線粒體的保護(hù)作用.pdf

1、目的： 觀察心肌缺血后處理對(duì)大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的作用。著重探討心肌缺血后處理對(duì)大鼠離體心肌線粒體的作用，從缺血后處理對(duì)心肌線粒體Ca2+的轉(zhuǎn)運(yùn)包括Ca2+攝取，調(diào)節(jié)線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔（mPTP）開放，呼吸鏈即線粒體內(nèi)膜上一組酶的復(fù)合體活性及心肌釋放的乳酸脫氫酶（LDH）活性、心肌梗死面積的影響。 方法： 取16只大鼠隨機(jī)分為2組，依照Langendorff離體心臟模型對(duì)其進(jìn)行逆行灌注，灌注數(shù)秒后心臟開始搏

2、動(dòng)，用Krebs-Henseleit液平衡灌注10 min，心臟搏動(dòng)達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。對(duì)照組：全心缺30 min，用K-H液再灌注3 h；后處理組：全心缺血30 min后，再灌注30 s，缺血30 s，反復(fù)3次，然后持續(xù)再灌注3 h。采用紫外分光光度法測(cè)定心肌釋放的LDH活性。用TTC染色法測(cè)定心肌梗死面積。利用差速離心的方法提取心肌細(xì)胞線粒體，應(yīng)用福林酚法測(cè)定線粒體蛋白濃度。借助分光光度計(jì)觀察心肌線粒體Ca2+的轉(zhuǎn)運(yùn)包括Ca2+攝取及線粒

3、體通透性轉(zhuǎn)換孔（mPTP）開放。利用試劑盒檢測(cè)呼吸鏈即線粒體內(nèi)膜上一組酶的復(fù)合體活性。 結(jié)果： 1.心肌缺血后處理對(duì)大鼠心肌釋放的LDH活性和心肌梗死面積的影響后處理組心肌釋放的LDH活性顯著低于對(duì)照組（P<0.01）；與對(duì)照組相比，后處理組心肌梗死面積縮?。≒<0.01）。 2.缺血對(duì)線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔（mPTP）開放的調(diào)節(jié) 對(duì)照組Cyt C釋放速度與最大釋放量均明顯高于后處理組（P<0.01），表明心

4、肌缺血后處理延遲了mPTP開放。 3.缺血后處理對(duì)呼吸鏈即線粒體內(nèi)膜上一組酶的復(fù)合體活性的影響后處理組線粒體復(fù)合體活性明顯高于對(duì)照組（P<0.01）。 4.缺血后處理對(duì)心肌線粒體鈣離子的轉(zhuǎn)運(yùn)Ca2+攝取的影響 后處理組心肌線粒體Ca2+最大攝取量低于對(duì)照組（P<0.01）。 結(jié)論： 1.缺血后處理能夠縮小心肌梗死面積；減少缺血再灌注損傷心肌細(xì)胞LDH的釋放，對(duì)缺血再灌注損傷心肌具有保護(hù)作用。

5、 2.缺血后處理能夠抑制Ca2+誘發(fā)的mPTP開放，減少線粒體Cyt C釋放，從而減少細(xì)胞凋亡，起到保護(hù)缺血再灌注損傷心肌的作用。 3.缺血后處理能夠增強(qiáng)呼吸鏈即線粒體內(nèi)膜上一組酶的復(fù)合體活性，從而保護(hù)線粒體產(chǎn)生ATP，為細(xì)胞的一切活動(dòng)提供能量。 4.缺血后處理能夠明顯減少線粒體鈣離子的攝取，減輕線粒體鈣超載。避免了由于線粒體鈣超載而導(dǎo)致mPTP呈高通透狀態(tài)廣泛持久開放，線粒體腫脹破壞，細(xì)胞能量耗竭的現(xiàn)象，最終起到保護(hù)