胰島素后處理對(duì)離體大鼠心肌的保護(hù)作用及其機(jī)制.pdf

1、目的：探討胰島素（Insulin）后處理對(duì)離體大鼠心肌的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。 方法：將32只Wistar大鼠隨機(jī)分成4組，對(duì)照組（CON組），缺血再灌注組（I/R組），低劑量胰島素后處理組（L-POST組），高劑量胰島素后處理組（H-POST組），每組8只。CON組開胸取左心室肌作為缺血前對(duì)照；I/R組、L-POST組和H-POST組建立離體心臟Langendorff-Neely灌注模型，預(yù)灌注K-H緩沖液30 min后，灌注

2、4℃STH-2心臟停搏液，停搏心臟并低溫維持30 min，I/R組復(fù)灌K-H緩沖液60 min；L-POST組（20U/L）和H-POST組（50U/L）于復(fù)灌期給予含胰島素的K-H液灌注60min后，取左心室肌備用。采用免疫組化和Western Blot分別檢測(cè)大鼠心室肌eNOS和PKC的分布和量的變化；TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)（Apoptotic index，AI）。 結(jié)果：eNOS的免疫組化顯示，CON組、I/R組

3、、L-POST組和H-POST組表達(dá)量分別為（0.15±0.01）、（0.19±0.02）、（0.25±0.06）和（0.29±0.04）；Western blot檢測(cè)顯示，各組表達(dá)量分別為（17.88±0.41）、（33.67±3.92）、（45.73±2.46）和（50.52±3.83），其中胰島素后處理組（包括L-POST組和H-POST組）eNOS的WB表達(dá)量高于I/R組（P<0.05），H-POST組高于L-POST組（P<0

4、.05）。PKC的免疫組化顯示，CON組、I/R組、L-POST組和H-POST組PKC的表達(dá)量分別為（0.08±0.06）、（0.15±0.02）、（0.21±0.03）和（0.26±0.04）。Western blot檢測(cè)顯示各組PKC的表達(dá)量分別為（15.11±8.57）、（29.26±2.71）、（40.59±7.43）和（46.52±1.90），其中胰島素后處理組PKC的WB表達(dá)量高于I/R組（P<0.05），H-POST組高

5、于L-POST組（P<0.05）。 CON組、I/R組、L-POST組、H-POST組各組心肌細(xì)胞的凋亡指數(shù)分別為（3.30±0.10）、（18.46±8.55）、（14.78±5.57）和（9.38±2.41），提示胰島素后處理組凋亡指數(shù)低于I/R組（P<0.05），H-POST組低于L-POST組（P<0.05）。 結(jié)論：胰島素后處理能夠減輕缺血-再灌注對(duì)離體鼠心的損傷，高劑量的胰島素后處理對(duì)缺血/再灌注心肌細(xì)胞具