胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ加入心臟停搏液對(duì)大鼠離體心臟保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　胰島素樣生長(zhǎng)因子(Insulin-like growth factors，IGFs)系統(tǒng)由多種具有廣泛生物學(xué)功能的細(xì)胞增殖調(diào)控因子組成，包括胰島素(Insulin)、胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅰ（Insulin-like growth factorⅠ，IGF-Ⅰ）和胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ(Insulin-like growth factor Ⅱ，IGF-Ⅱ)三大類配體，除具有胰島素樣的生物學(xué)活性外，還能夠發(fā)揮多功能生長(zhǎng)因子的作用促進(jìn)

2、機(jī)體組織生長(zhǎng)發(fā)育，并具有雙向調(diào)節(jié)作用，根據(jù)發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)的通路不同既可促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化，也可抑制細(xì)胞凋亡。其中的IGF-Ⅱ可通過結(jié)合激活I(lǐng)GF-ⅠR起到抑制細(xì)胞凋亡的作用，也可在心臟復(fù)灌后發(fā)揮保護(hù)心肌細(xì)胞的作用。
　　在心臟移植手術(shù)中，心臟停跳保存時(shí)的細(xì)胞凋亡影響手術(shù)的效果，改進(jìn)心臟保存液配方，減輕心肌細(xì)胞凋亡和保護(hù)心臟是目前的研究熱點(diǎn)之一。本實(shí)驗(yàn)通過離體灌注大鼠心臟模型，研究St.Thomas'Ⅱ停搏液中添加IGF-Ⅱ?qū)Υ笫蠊?/p>

3、心保存的保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制。
　　方法：
　　16只SD大鼠隨機(jī)分為St.Thomas'Ⅱ(STH)停搏液組（對(duì)照組）和rh-IGF-Ⅱ+STH停搏液組（實(shí)驗(yàn)組），每組8只，每1mlSTH含10ngrh-IGF-Ⅱ。麻醉后開胸取出心臟迅速連于Langendorff灌注裝置上，主動(dòng)脈根部灌注37℃預(yù)溫、pH值為7.4、以95％的O2及5％CO2混合氣飽和的KHB緩沖液，將連有壓力傳感器的測(cè)壓管經(jīng)過左心耳、左心房、左房室

4、瓣通入左心室，將傳感器與M6240B多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)相連接，測(cè)定心室血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。10分鐘后關(guān)閉主動(dòng)脈灌注，開放左心房灌注管，轉(zhuǎn)入Neely左心做功，收集冠脈流出液5分鐘。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組分別用STH停搏液和rh-IGF-Ⅱ+STH停搏液作為心臟停跳液，待心臟停跳后分別放入STH液和rh-IGF-Ⅱ+STH液中4℃保存3小時(shí)。將心臟重新置于Langendorff灌注裝置上灌注，灌注條件與保存前保持一致。檢測(cè)保存前后血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)

5、，計(jì)算恢復(fù)率;測(cè)定冠脈流出液恢復(fù)率及其所含的心肌酶肌鈣蛋白Ⅰ(Cardiac TroponinⅠ，cTnI)的含量;取保存3小時(shí)后心臟左室前壁心肌組織，用熒光分析法檢測(cè)心肌組織中Caspase-3含量，用TUNEL法測(cè)定心肌細(xì)胞凋亡情況。
　　采用統(tǒng)計(jì)軟件包SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果用(x)±s表示，各組樣本均數(shù)之間采用單因素方差分析（One-way analysis of variance，One-way ANOVA）

6、，顯著性水準(zhǔn)為p＜0.05。
　　結(jié)果：
　　與對(duì)照組相比:
　　1.實(shí)驗(yàn)組各血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)左心室舒張壓、左心室收縮壓、左心室最大壓力變化速率、冠脈流出量恢復(fù)率較好，兩組比較，差異具有顯著性(p＜0.05);
　　2.實(shí)驗(yàn)組冠脈流出液中cTnI含量0.32±0.03ng/ml，較之對(duì)照組0.37±0.02ng/ml明顯降低，兩組比較，差異顯著性明顯(p＜0.01);
　　3.實(shí)驗(yàn)組心肌組織中Caspase-

7、3活性單位為0.45±0.02，較之對(duì)照組的0.52±0.04活性單位明顯減少，兩組比較，差異顯著性明顯(p＜0.01);
　　4.實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)18.83±1.97％，較之對(duì)照組的凋亡指數(shù)22.35±2.90％減輕，兩組比較，差異具有顯著性(p＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　在STH停搏液中加入胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ，所保存心臟的血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)恢復(fù)較好，冠脈流量增加，減少心肌酶cTnI漏出，Caspase-3活性