2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、肺癌是當(dāng)今世界常見惡性腫瘤之一,已成為絕大多數(shù)國家癌癥死亡的首要原因。肺癌的發(fā)病機(jī)制仍不清楚,而其發(fā)病率和死亡率呈逐年上升的趨勢,如何做到早期發(fā)現(xiàn)肺癌成為防治的關(guān)鍵。蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法和技術(shù)為肺癌的早期診斷和防治的研究提供了有利條件。 [目的]利用蛋白質(zhì)組學(xué)方法,建立分辨率高和重復(fù)性好的人肺腺癌及其正常人血清蛋白質(zhì)的雙向凝膠電泳圖譜,并識(shí)別鑒定其差異表達(dá)的蛋白質(zhì),從而尋找肺腺癌早期特異性的診斷指標(biāo)。 [方法](1)收集8

2、例肺腺癌患者血清及4例正常人血清,于-80℃冰箱保存。用SwellGel(R)Blue白蛋白去除試劑盒過濾血清,并用Bradford法測定其濾液總蛋白濃度,然后分裝凍存用于分析。 (2)應(yīng)用固相IPG梯度雙向凝膠電泳分離肺腺癌患者及正常人血清總蛋白,凝膠經(jīng)銀染或考馬斯亮藍(lán)(Coomnassieblue)染色顯色后,用Gs-800光密度儀獲得凝膠圖像。經(jīng)PDQuest凝膠圖像分析軟件進(jìn)行分析后,找出有差異的蛋白點(diǎn)。 (3)

3、將部分差異的蛋白點(diǎn)從凝膠上挖下,胰蛋白酶進(jìn)行膠內(nèi)原位酶解,經(jīng)Voyager-DETMPROMALDI-TOF-MS儀分析獲得肽質(zhì)量指紋圖,然后利用Mascot查詢軟件搜尋數(shù)據(jù)庫鑒定蛋白質(zhì)。 [結(jié)果](1)獲得了重復(fù)性較好的雙向電泳銀染圖譜。圖像分析檢測發(fā)現(xiàn)2塊膠斑點(diǎn)匹配率達(dá)78%,在IEF方向的平均偏差為(1.82±0.66)mm,SDS-PAGE方向的平均偏差為(2.24±0.63)mm。 (2)肺腺癌患者血清與正常健

4、康個(gè)體血清的雙向電泳圖譜經(jīng)PDQuest7.1軟件匹配分析,共篩選出24個(gè)差異的蛋白點(diǎn),其中Spot1~8在肺腺癌患者的血清中高表達(dá);Spot9,10,11,12號(hào)蛋白點(diǎn)僅出現(xiàn)在肺腺癌患者的血清中;Spot13~22號(hào)蛋白點(diǎn)在肺腺癌患者的血清中低表達(dá);Spot23,24號(hào)蛋白點(diǎn)僅出現(xiàn)在正常人的血清中。 (3)從24個(gè)差異的蛋白點(diǎn)中選出7個(gè)蛋白點(diǎn),經(jīng)膠內(nèi)原位酶解-質(zhì)譜指紋圖分析,獲得了7張肽質(zhì)量指紋圖譜,經(jīng)數(shù)據(jù)庫查詢分析,成功的鑒

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