宮頸上皮內(nèi)瘤變中HPV感染與病理學(xué)及細(xì)胞學(xué)改變的相關(guān)性的探討.pdf

1、實驗?zāi)康模?宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)是宮頸癌的癌前病變，對CIN的早期診斷和有效的治療，是預(yù)防宮頸癌發(fā)生的重要途徑。CIN的檢測和確定包括臨床檢查、細(xì)胞學(xué)、陰道鏡檢、活體組織檢查和病理學(xué)診斷，以及必要實驗室PCRDNA檢測分析等，隨著CIN診斷日趨成熟，細(xì)胞學(xué)聯(lián)合陰道鏡下活檢仍是CIN及早期宮頸癌可靠的早期診斷方法。國內(nèi)外大量研究表明，高危型HPV感染是C

2、IN及宮頸癌發(fā)病的直接原因，荷蘭病理學(xué)Dr．CJLM Meijer在阿姆斯特丹及沃卓倫的研究中證實，HPV高危型檢測診斷CIN的陰性預(yù)測值>99％，HPV DNA檢測與細(xì)胞學(xué)檢查聯(lián)合進行宮頸上皮內(nèi)瘤變的篩查，其篩查效率高于單獨使用細(xì)胞學(xué)檢查，研究結(jié)果提示聯(lián)合兩種方法的檢測率幾乎高達100％。 實驗方法： 1、研究對象 本實驗選取遼寧省腫瘤醫(yī)院婦科門診就診患者為研究對象，以陰道鏡下活檢病理為診斷標(biāo)準(zhǔn)，樣本量為90例

3、，CIN Ⅰ 30例，CINⅡ 30例，CINⅢ30例。 2、用雜交捕獲的方法檢測HPV DNA 采用Digene公司提供的雜交捕獲Ⅱ代(HC-Ⅱ)HPV DNA檢測系統(tǒng)進行檢測，試劑采用Digene公司提供的高危型HPV DNA試劑盒，檢測探針包括13種HPV亞型，即16、18、31、33、35、39、45、51、56、58、59、68型。主要步驟包括：(1)裂解；(2)雜交；(3)捕獲：(4)反應(yīng)：(5)沖洗；(6)

4、收集信號；(7)結(jié)果判定：HPV DNA含量超過1pg/ml即RLU/CO比值大于1為陽性。 3、薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測方法 專用采樣器采集宮頸脫落細(xì)胞，將標(biāo)本保存盛有細(xì)胞保存液的小瓶中，標(biāo)本經(jīng)系統(tǒng)處理后制成薄層涂片，95％酒精固定，巴氏染色，請有經(jīng)驗的病理醫(yī)生閱片，依據(jù)TBS細(xì)胞分類法做出判斷，結(jié)果判定：結(jié)果是ASCUS以上者為陽性。 4、陰道鏡下病理檢查 對陰道鏡下有白色病變、鑲嵌、腺體開口、異型血管

5、等可疑病變部位進行定點活檢，對鏡下正常者行常規(guī)4點活檢，活檢組織送病理。 5、統(tǒng)計學(xué)方法 實驗數(shù)據(jù)中各檢出率的差異分析采用x<'2>檢驗，顯著性差異界限為α=0.05，實驗數(shù)據(jù)采用SPSS12統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。 實驗結(jié)果 1．高危型HPV感染組中CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CINⅢ的檢出率分別為51.6％、58.1％、93.5％。說明高危型HPV感染與CIN的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，病變程度愈高HPV感染率愈