妊娠相關(guān)性宮頸上皮內(nèi)瘤變的檢測方法比較及臨床意義.pdf

1、近年子宮頸癌發(fā)病率明顯上升及年輕化。宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)為癌前病變，應(yīng)用三階梯能明確病變級別。人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌發(fā)生的基本因素，高危型HPV的持續(xù)感染將引發(fā)CIN及宮頸癌。發(fā)達(dá)國家宮頸癌防治的經(jīng)驗及流行病學(xué)資料證明，如果對適齡婦女(25～65歲)每隔12月進(jìn)行一次有效的宮頸篩查，并對篩查出的CIN給予規(guī)范治療，那么絕大多數(shù)婦女將能有效地防治宮頸癌。宮頸癌是妊娠期最常見的惡性腫瘤。本文目的在于探討妊娠相關(guān)時期婦女進(jìn)行宮

2、頸篩查的必要性，了解妊娠相關(guān)性CIN的患病現(xiàn)狀，比較不同篩查辦法，探討應(yīng)用FISH技術(shù)檢測宮頸上皮細(xì)胞中hTERC基因擴增的臨床意義，同時了解母嬰間HPV垂直傳播狀況。
　　 目的：
　　 1.調(diào)查妊娠相關(guān)性宮頸上皮內(nèi)瘤變現(xiàn)狀，探討宮頸篩查臨床意義。
　　 2.應(yīng)用熒光原位雜交技術(shù)(FISH)研究3號染色體長臂端粒酶基因(hTERC)在宮頸上皮細(xì)胞中的表達(dá)；分析比較異常在HPV感染中、異常的TCT、及病理CIN中

3、hTERC基因異常表達(dá)的臨床意義。
　　 3.應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解析/電離飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)技術(shù)檢測胎盤、羊膜等樣本HR-HPV分型，探討HR-HPV母嬰間垂直傳播狀況。
　　 方法：
　　 1.2007年11月至2009年4月我院產(chǎn)科門診就診的1912例婦女，1165例進(jìn)行宮頸細(xì)胞學(xué)篩查(TCT)同時，857例接受基因雜交信號捕獲檢測技術(shù)II代(HC-II)檢測HR-HPV，按照三階梯原則進(jìn)

4、行隨診，至產(chǎn)后3月至1年。
　　 2.抽取上述67例宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本，采取TCT制片法進(jìn)行制片。選擇細(xì)胞學(xué)正常的宮頸脫落細(xì)胞20例為對照組建立實驗閾值。應(yīng)用FISH技術(shù)，進(jìn)行hTERC基因檢測，記錄細(xì)胞數(shù)量、熒光信號強度.依據(jù)細(xì)胞學(xué)結(jié)果、是否為HR-HPV感染、組織學(xué)結(jié)果進(jìn)行分組，比較分析hTERCJ基因在不同組別中的異常表達(dá)。
　　 3.收集HR-HPV呈持續(xù)感染的孕婦分娩時的胎盤、羊膜、臍帶、臍帶血、新生兒口腔分泌物

5、、乳汁，采用MALDI-TOF MS進(jìn)行HR-HPV分型檢測，了解HPV母嬰垂直傳播狀況及探討傳播與分娩方式的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：
　　 1.HR-HPV陽性118例，孕期14.98％、產(chǎn)后4.17％。TCT異常36例。正常組、ASCUS、ASC-H、LSIL及HSIL，HR-HPV檢出率分別為11.20％、53.85％、75％、87.5％、83.33％。HR-HPV持續(xù)感染19例、轉(zhuǎn)陰28例；平均年齡分別為30.4歲

6、、30.O歲，病毒載量≥10 pg/m118例、病毒載量<10 pg/ml10例，TCT異常、TCT進(jìn)展在兩組中分別為11例和1例、6例(均為HPV持續(xù)感染者)和0例。異常TCT好轉(zhuǎn)12例、維持原狀7例(6例HPV持續(xù)陽性、1例HPV陰性)。
　　 2.終止妊娠的801例中，流產(chǎn)率、早產(chǎn)率、胎膜早破率、剖宮產(chǎn)率分別0.74％、3.7％、24.4％、69.1％，與同時期未接受篩查的孕婦(747例)比較無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　

7、3.hTERC基因陽性表達(dá)率：細(xì)胞學(xué)分組中正常組、異常組分別為7.7％、50％，兩組比較有顯著差異(P<0.05)，其中ASCUS、LSIL、HSIL組間比較有顯著差異(P<0.05)；組織學(xué)分組中炎癥、CIN組分別為25％、92.3％，兩組比較有顯著差異(P<0.05)。
　　 4.HR-HPV檢測陽性病例44例中(陽性組)，hTERC基因陽性表達(dá)率25％，HR-HPV陰性病例(陰性組)10例中hTERC基因陽性表達(dá)率0％，陽

8、性組、陰性組間比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，未檢測HR-HPV3例。
　　 5.檢測持續(xù)陽性15例孕婦分娩時的胎盤、羊膜、臍帶、臍帶血、新生兒口腔分泌物、乳汁等樣本共58例，檢出6個陽性病例、8例陽性樣本，包括HPV16、18、52、58、66等。
　　 結(jié)論：
　　 1、HR-HPV檢出率產(chǎn)后明顯低于孕期，總檢出率近似于我國流行病學(xué)結(jié)果[1]。按照三階梯原則對異常者隨訪至產(chǎn)后12月：40％持續(xù)感染、60％轉(zhuǎn)

9、陰，比較兩組年齡、分娩方式無顯著差異；比較TCT異常率、進(jìn)展數(shù)及HPV載量(>10pg/ml)差異有統(tǒng)計學(xué)意義；持續(xù)感染者18％維持異常TCT、18％ TCT升級、18％TCT反復(fù)不定，僅46％ TCT維持為正常。以上數(shù)據(jù)充分說明妊娠期TCT異常與HPV持續(xù)感染密切相關(guān)，進(jìn)一步分析分析原因后發(fā)現(xiàn)TCT結(jié)果同時與生殖道的細(xì)菌、滴蟲、衣原體感染等也相關(guān)。規(guī)范的三階梯有利于早期發(fā)現(xiàn)CIN，妊娠期篩查是安全必要的。
　　 2、hTERC