新型內(nèi)皮素受體拮抗劑對大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的：研究新型內(nèi)皮素受體拮抗劑ETP-508、GF-063對不同模型培養(yǎng)的大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞(PASMCs)增殖的影響。 方法：貼壁原代培養(yǎng)大鼠PASMCs。分別采用低氧和內(nèi)皮素進(jìn)行刺激PASMCs的增殖為模型。兩種模型實(shí)驗(yàn)均分為五組：正常對照組，模型組，模型+BQ-485組，模型+ETP-508組，模型+GF-063組，各種藥物終濃度均分別為10-6、10-7、10-8、10-9mol/L進(jìn)行比較，上述五組細(xì)胞均分別培養(yǎng)24

2、h、48h、72h。采用MTT法(波長492nm)檢測BQ-485、ETP-508和GF-063對PASMCs增殖的影響(A值)；流式細(xì)胞儀測定PASMCs細(xì)胞周期的變化；放免法測定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中內(nèi)皮素(ET-1)的含量。 結(jié)果： 1、MTT法檢測PASMCs增殖：低氧模型中，給予低氧可引起PASMCs的增殖，A值0.386±0.017，BQ-485、ETP-508、GF-063均在10-8mol/L能抑制低氧引起的P

3、ASMCs增殖，A值降低(P＜0.05)，分別為0.343±0.021、0.333±0.022、0.329±0.026，并隨著濃度的增高A值下降增加，但各濃度之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；內(nèi)皮素模型組同樣可以引起PASMCs的增殖，A值增高0.346±0.014，給予BQ-485、ETP-508、GF-063藥物后，A值下降分別為0.248±0.048、0.240±0.036、0.254±0.045，在10-6～10-8mol/

4、L濃度之間均可抑制PASMCs的增殖，但各濃度之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2、流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞周期：模型組G2、S期細(xì)胞比率增高，分別為5.60±0.13、11.95±0.35，6.43±0.15、8.17±0.25，DNA合成增加，與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05～0.01)；模型+BQ-485組，模型+ETP-508組和模型+GF-063組的G2、S期細(xì)胞比率下降，G1期細(xì)胞增多，DNA合成減少，與模型組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

5、義(P＜0.05)，但不同濃度之間比較，各組細(xì)胞的百分比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、放免法測定內(nèi)皮素(ET-1)的含量：低氧組可以引起ET-1水平的增高，低氧48h后ET-1為152.11±7.47 pg/ml、分別給予BQ-485、ETP-508、GF-063藥物干預(yù)后，內(nèi)皮素水平下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)其中BQ-485在10-7mol/L可以抑制ET-1的增高，而ETP-508、GF-063在10-9mol/L即可能夠使E

6、T-1的下降，ET-1水平分別為109.61±7.62pg/ml、117.34±3.58pg/ml、124.45±11.70pg/ml；內(nèi)皮素組ET-1水平增高，BQ-485(10-7mol/L)、ETP-508、GF-063藥物干預(yù)后，內(nèi)皮素水平下降，ET-1值分別為175.97±1.96pg/ml、166.58±3.68pg/ml、165.35±4.26pg/ml、161.81±2.97pg/ml，但藥物各濃度之間比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意