兩種凝集素參與克氏原螯蝦先天性免疫反應的分子機制研究.pdf

1、甲殼動物缺乏適應性免疫系統(tǒng)，主要依賴先天性免疫系統(tǒng)抵御病原感染。凝集素(lectin)是一類可以結合特異性糖分子的蛋白，在免疫識別和免疫應答中發(fā)揮重要的作用。C-型凝集素、L-型凝集素屬于動物型凝集素。甲殼動物凝集素的研究，主要集中在C型凝集素（C-type lectin，CTL），然而L型凝集素(L-typelectin，LTL)及纖維膠凝樣蛋白(Ficolin-like proteins，FLPs)凝集素的研究比較少。本課題以克氏原

2、螯蝦為模型，研究了LTL和FLPs在抵御病原感染中的功能，結果如下:
　　1、從克氏原螯蝦體內鑒定了一種新的LTL，并命名為PcL-lectin。生物信息學分析表明PcL-lectin同內質網-高爾基體交換蛋白-53 kDa（endoplasmicreticulum Golgi intermediate compartment-53 kDa, ERGIC-53）有較高的相似性。在白斑綜合征病毒(WSSV)刺激后，PcL-lecti

3、n表達水平顯著下降。進一步分析表明，體內注射PcL-lectin的重組蛋白(rPcL-lectin)可顯著促進WSSV在克氏原螯蝦體內的復制水平。而體內敲降PcL-lectin的表達水平能有效抑制WSSV在克氏原螯蝦體內的復制能力。免疫細胞定位分析表明，PcL-lectin可定位在細胞膜上。Pull-down和免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation, Co-IP）研究表明，PcL-lectin同WSSV囊膜蛋白VP24

4、表現出結合活性。這些結果表明WSSV的感染過程需要PcL-lectin的參與，為抗WSSV感染研究提供了新的依據。
　　2、從克氏原螯蝦體內鑒定了一種新的FLP，命名為PcFLP1。PcFLP1在血細胞、心、肝胰腺、鰓、胃和腸等組織中均有分布。在血細胞、肝胰腺和腸道中，PcFLP1被副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）誘導上調表達。PcFLP1的重組蛋白（rPcFLP1）能有效抑制副溶血弧菌（弧菌）對肝胰腺