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文檔簡介
1、成骨生長肽(OGP)是從損傷后再生的骨髓培養(yǎng)基質(zhì)中分離純化所得的一種具有14個氨基酸的小分子多肽。OGP廣泛存在于哺乳動物的血清中,進化上高度保守,因此具有很好的同源性。研究發(fā)現(xiàn)OGP及其C端5肽可以促進造骨和造血作用。對體外培養(yǎng)的MC3T3E1成骨細胞、NIH3T3成纖維細胞和成骨性Ros17/2細胞等均有促增殖和分化作用。但目前,OGP的細胞作用機理還不明確。為此,本實驗采用中科院生化所人工合成的sOGP,設計poly-OGP制備O
2、GP抗體,觀察sOGP對NIH3T3細胞的促增殖作用,并利用制備抗體的免疫分析法及其他技術(shù)探討OGP及其C端5肽對NIH3T3細胞的增殖作用機理。通過實驗得出結(jié)論:Ploy-OGP免疫動物可以得到更單一及成本更低廉的抗血清。MTT法和細胞計數(shù)法是較好的測定增殖的方法。細胞周期分析及Ⅰ型膠原RT-PCR法及ELISA法測定,可以提供更多的增殖信息。sOGP(14肽及5肽)可在低濃度下通過對OGP的正反饋作用促進NIH3T3細胞增殖。OG
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