化瘀通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病大鼠的干預(yù)作用及其對(duì)腎臟結(jié)蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的:糖尿病腎?。╠iabeticnephropathy，DN）泛指由于糖尿病導(dǎo)致的腎小球病變，是糖尿病發(fā)展到一定階段出現(xiàn)的嚴(yán)重并發(fā)癥。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)建立DN大鼠模型，予化瘀通絡(luò)中藥進(jìn)行干預(yù)，通過(guò)觀察大鼠一般情況、腎臟組織形態(tài)學(xué)變化，以及檢測(cè)24小時(shí)尿蛋白定量、血常規(guī)、血生化指標(biāo)、結(jié)蛋白(desmin)表達(dá)水平等，研究化瘀通絡(luò)中藥的作用，并探討其可能的作用機(jī)制。
　　 方法:

2、健康雄性SD大鼠80只，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，隨機(jī)選15只做為正常對(duì)照組(C)，剩余大鼠禁食12小時(shí)以上，一次性腹腔注射STZ55mg/kg，72小時(shí)后尾靜脈測(cè)隨機(jī)血糖≥16.7mmol/L為造模成功。成模大鼠隨機(jī)分為模型組(M)、全方組(Q)、化瘀組(H)、通絡(luò)組(T)、厄貝沙坦組(E)，相應(yīng)藥物灌胃16周。于第16周末收集大鼠24小時(shí)尿液。禁食12小時(shí)以上，動(dòng)物麻醉狀態(tài)下取血檢測(cè)血液指標(biāo)，并留取腎組織進(jìn)行光鏡、電鏡、免疫組化、Real-T

3、imePCR檢測(cè)。
　　 結(jié)果:
　　 1、實(shí)驗(yàn)大鼠的一般情況
　　 正常對(duì)照組大鼠一般情況良好;其它大鼠在注射STZ成模后，均出現(xiàn)典型的三多一少癥狀，且以模型組最為顯著;各給藥組大鼠在治療過(guò)程中癥狀均有不同程度的緩解。治療期間全方組死亡1只，厄貝沙坦組死亡2只，模型組死亡6只。
　　 2、24小時(shí)尿蛋白定量(24hUTP)
　　 結(jié)果顯示:各治療組24小時(shí)尿蛋白定量水平與正常對(duì)照組及模型組均有差

4、異(P＜0.05)，比正常對(duì)照組明顯升高，比模型組明顯降低;各治療組之間比較，化瘀組24小時(shí)尿蛋白定量明顯高于與全方組、通絡(luò)組和厄貝沙坦組（P＜0.05）;全方組、通絡(luò)組和厄貝沙坦組之間無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 3、血液指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果
　　 結(jié)果顯示:血常規(guī)中模型組與正常對(duì)照組、全方組、化瘀組、通絡(luò)組、厄貝沙坦組相比，血小板計(jì)數(shù)明顯增多(P＜0.05)，正常對(duì)照組、全方組、化瘀組、通絡(luò)組、厄貝沙坦組之間無(wú)明顯差異

5、(P＞0.05);模型組、厄貝沙坦組與正常對(duì)照組、全方組、化瘀組、通絡(luò)組相比，大型血小板比率(P-LCR)顯著升高（P＜0.05）;模型組、厄貝沙坦組之間，正常對(duì)照組、全方組、化瘀組、通絡(luò)組之間均無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 血生化中模型組及治療各組大鼠與正常對(duì)照組相比甘油三酯水平明顯升高(P＜0.05)，全方組、通絡(luò)組、厄貝沙坦組較模型組、化瘀組甘油三酯水平明顯降低(P＜0.05);模型組、全方組、化瘀組、通絡(luò)組與正常對(duì)

6、照組相比血漿總蛋白水平明顯降低(P＜0.05)，模型組、全方組、化瘀組、通絡(luò)組之間血漿總蛋白水平無(wú)明顯差異(P＞0.05)，厄貝沙坦組與正常對(duì)照組血漿總蛋白水平無(wú)明顯差異(P＞0.05);模型組及治療各組大鼠與正常對(duì)照組相比血漿白蛋白水平明顯降低(P＜0.05)，各治療組血漿白蛋白水平比模型組明顯升高（P＜0.05），各治療組之間無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 4、糖尿病性白內(nèi)障(DiabeticCataract，DC)

7、r>　　 結(jié)果顯示:正常對(duì)照組未發(fā)現(xiàn)白內(nèi)障大鼠;模型組全部為白內(nèi)障大鼠;全方組白內(nèi)障發(fā)病率45％;化瘀組白內(nèi)障發(fā)病率42％;通絡(luò)組白內(nèi)障發(fā)病率92％;厄貝沙坦組白內(nèi)障發(fā)病率90％。全方及化瘀組糖尿病性白內(nèi)障大鼠明顯少于通絡(luò)及厄貝沙坦組。
　　 5、腎組織形態(tài)學(xué)觀察
　　 5.1、光鏡觀察
　　 正常對(duì)照組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)清晰正常;模型組大鼠腎小球肥大，腎小囊呈裂隙狀，甚至出現(xiàn)球囊粘連，基底膜明顯增厚，系膜基質(zhì)增生

8、;與模型組相比，各治療組病理改變明顯減輕;各治療組間比較，化瘀組病理表現(xiàn)略重于其它治療組。
　　 5.2、電鏡觀察
　　 正常對(duì)照組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)清晰正常;模型組大鼠腎小球毛細(xì)血管基底膜均質(zhì)性增厚，系膜基質(zhì)增多，足細(xì)胞足突廣泛融合;與模型組相比，各治療組病理改變明顯減輕;各治療組間比較，化瘀組病理表現(xiàn)略重于其它治療組。
　　 6、免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腎組織desmin的表達(dá)
　　 結(jié)果顯示:正常對(duì)照組des

9、min在腎小球系膜細(xì)胞可見(jiàn)少量表達(dá)，足細(xì)胞無(wú)明顯表達(dá);與正常對(duì)照組相比，造模各組大鼠腎組織中desmin表達(dá)明顯增加(P＜0.05)，且在足細(xì)胞和系膜細(xì)胞均有表達(dá);與模型組相比，各治療組desmin的表達(dá)明顯減弱(P＜0.05);治療各組間比較，化瘀組desmin的表達(dá)最強(qiáng)，與全方組、通絡(luò)組和厄貝沙坦組有顯著差異(P＜0.05)。
　　 7、Real-TimePCR檢測(cè)腎組織desminmRNA的表達(dá)
　　 結(jié)果顯示:與

10、正常對(duì)照組相比，造模各組大鼠腎組織中desminrnRNA表達(dá)量明顯增加（P＜0.05）;與模型組相比，各治療組desminmRNA的表達(dá)量明顯減弱（P＜0.05）;治療各組間比較，化瘀組desminmRNA的表達(dá)量最大，與全方組、通絡(luò)組和厄貝沙坦組有顯著差異（P＜0.05）。
　　 結(jié)論:
　　 1、化瘀通絡(luò)中藥能改善糖尿病腎病大鼠的一般情況，減少尿蛋白，維持血漿蛋白含量，減輕糖尿病腎病病理表現(xiàn)，這些方面的作用與厄貝沙

11、坦相似。
　　 2、化瘀通絡(luò)中藥能減少血小板數(shù)量，降低其活性，從而防止DN血栓、栓塞等并發(fā)癥，該方面作用優(yōu)于厄貝沙坦。
　　 3、化瘀通絡(luò)中藥能降低血漿甘油三酯水平，改善糖尿病脂質(zhì)代謝紊亂，通絡(luò)中藥在該方面作用優(yōu)于化瘀中藥。
　　 4、化瘀通絡(luò)中藥能減少糖尿病性白內(nèi)障的發(fā)生，化瘀中藥在該方面作用優(yōu)于通絡(luò)中藥及厄貝沙坦。
　　 5、化瘀通絡(luò)中藥能降低糖尿病腎病大鼠腎臟desmin表達(dá)水平，提示其對(duì)DN的治療