Src激酶和VE-cadherin磷酸化參與顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成的研究.pdf

1、目的：
　　 顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成的病因和發(fā)病機(jī)制目前仍不清楚，最近研究發(fā)現(xiàn)血流動(dòng)力學(xué)改變導(dǎo)致的血管內(nèi)皮損害及血管壁炎癥可能是顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成的始動(dòng)環(huán)節(jié)。VE-cadherin在內(nèi)皮損傷修復(fù)、維持血管壁通透性和調(diào)控炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等方面發(fā)揮著重要作用，src激酶調(diào)控VE-cadherin磷酸化水平及炎癥相關(guān)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。最近發(fā)現(xiàn)VE-cadherin在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤壁的表達(dá)明顯減少的基礎(chǔ)上，結(jié)合國(guó)內(nèi)外對(duì)顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成機(jī)制和血管內(nèi)皮細(xì)胞間連接及

2、其調(diào)控兩方面的研究進(jìn)展，應(yīng)用實(shí)驗(yàn)性大鼠顱內(nèi)動(dòng)脈瘤模型模擬體內(nèi)顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成過(guò)程中的血管壁的損害，研究顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成過(guò)程中src激酶和VE-cadherin磷酸化的表達(dá)
　　 方法：
　　 1：建立腎性高血壓誘導(dǎo)的SD大鼠實(shí)驗(yàn)性顱內(nèi)動(dòng)脈瘤模型：將60只雄性SD大鼠，隨機(jī)分為2組。手術(shù)組即銀夾組40只，用內(nèi)徑為0.3mm的銀夾夾閉雙側(cè)腎動(dòng)脈主干使雙側(cè)腎動(dòng)脈主干狹窄和左側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎。手術(shù)組術(shù)后次日給予2％的鹽水的高鹽飲食喂養(yǎng)

3、，誘導(dǎo)動(dòng)脈瘤的發(fā)生；對(duì)照組即假手術(shù)組20只，僅暴露雙側(cè)腎動(dòng)脈主干和左側(cè)頸總動(dòng)脈，不作其他處理，術(shù)后正常喂養(yǎng)。術(shù)后喂養(yǎng)3個(gè)月后處死SD大鼠。在顯微鏡下解剖出腦底部的willis動(dòng)脈環(huán)，取右側(cè)大腦前動(dòng)脈-嗅動(dòng)脈(ACA-OA)的分叉處血管。
　　 2：應(yīng)用蛋白印跡(western boltting)檢測(cè)src激酶、phosphor-VE-cadherin(Tyr-685)、phosphor-VE-cadherin(Tyr-658)和

4、phosph-VE-cadherin(Tyr-731)大鼠腦動(dòng)脈瘤中的表達(dá)和實(shí)時(shí)定量PCR(RT-qPCR)的方法檢測(cè)src激酶在大鼠腦動(dòng)脈瘤中的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1、蛋白印跡結(jié)果(western boltting)：實(shí)驗(yàn)組中src激酶、phosphor-VE-cadherin(Tyr-685)、phosphor-VE-cadherin(Tyr-658)和phosphor-VE-cadherin(Tyr-731

5、)均有明顯表達(dá)。與正常組對(duì)比，實(shí)驗(yàn)組的src激酶和phosphor-VE-cadherin(Tyr-685)，phosphor-VE-cadherin(Tyr-658)和phosphor-VE-cadherin(Tyr-731)的表達(dá)明顯升高。
　　 2、實(shí)時(shí)定量PCR(RT-qPCR)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組src激酶mRNA表達(dá)與正常對(duì)照相比明顯升高(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 SD大鼠實(shí)驗(yàn)性腦動(dòng)脈瘤中src激