BCG干預(yù)對(duì)哮喘干細(xì)胞因子、巨噬細(xì)胞集落刺激因子表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、通過觀察哮喘小鼠干細(xì)胞因子(stem cell factor,SCF)、巨噬細(xì)胞集落刺激因子(macrophagecolony-stimulating factor,M-CSF)及白細(xì)胞介素-12(interleukin-12,IL-12)表達(dá)的變化以及卡介苗(bacillus calmette-guerin,BCG)干預(yù)的影響，了解SCF、M-CSF在哮喘發(fā)病中的作用，探討B(tài)CG抗哮喘氣道炎癥可能的機(jī)制。 方法： 健康

2、雄性昆明小鼠30只，隨機(jī)分成三組，每組10只。①哮喘組：每只小鼠用10μg卵清蛋白(ovalbumin,OVA)和1mg氫氧化鋁(Al(OH)3)腹腔注射進(jìn)行致敏，1％OVA霧化吸入激發(fā)建立小鼠哮喘模型。②BCG干預(yù)組：OVA致敏、激發(fā)方法同哮喘組，在OVA致敏前7、3、1天每只小鼠皮內(nèi)注射BCG 0.025mg。③對(duì)照組：用同等劑量的生理鹽水(NS)代替OVA進(jìn)行腹腔注射和霧化吸入。所有小鼠于末次霧化吸入24小時(shí)后取材，收集支氣管肺泡

3、灌洗液(bronchoal veolar lavage fluid,BALF)進(jìn)行細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞(eosinpohils,EOS)計(jì)數(shù)；采用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)方法檢測BALF及骨髓沖洗液中SCF、M-CSF以及BALF中IL-12的水平；肺組織切片行蘇木素-伊紅(HE)染色，觀察病理學(xué)改變；采用免疫組織化學(xué)圖象分析技術(shù)測定肺組織中SCF、M-CSF蛋白的表

4、達(dá)。 結(jié)果： 1．肺組織病理學(xué)分析：哮喘組肺組織中可見大量的炎性細(xì)胞浸潤，BCG干預(yù)組炎性細(xì)胞浸潤較哮喘組顯著減輕，對(duì)照組未見明顯炎性細(xì)胞浸潤。 2．哮喘組、BCG干預(yù)組BALF中細(xì)胞總數(shù)、EOS計(jì)數(shù)均較對(duì)照組明顯增高。BCG干預(yù)組與哮喘組比較，細(xì)胞總數(shù)、EOS計(jì)數(shù)有明顯下降。 3．與對(duì)照組比較，哮喘組小鼠肺組織及BALF中的SCF表達(dá)均增多。BCG干預(yù)組與哮喘組比較，肺組織及BALF中的SCF表達(dá)均無顯

5、著變化。哮喘組肺組織及BALF中的SCF表達(dá)均與BALF中EOS計(jì)數(shù)呈正相關(guān)。 4．哮喘組小鼠肺組織及BALF中的M-CSF表達(dá)較對(duì)照組均顯著增高，BCG干預(yù)組與哮喘組比較，肺組織及BALF中的M-CSF表達(dá)均下降。 5．哮喘組小鼠BALF中IL-12較對(duì)照組明顯下降，BCG干預(yù)組與哮喘組比較IL-12水平上升。哮喘組BALF中M-CSF與IL-12水平呈負(fù)相關(guān)，BCG干預(yù)組BALF中M-CSF與IL-12水平亦呈負(fù)相關(guān)

6、。 6．三組小鼠骨髓中均有SCF、M-CSF表達(dá)，但三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1．早期給予BCG干預(yù)能夠顯著抑制哮喘小鼠氣道EOS的浸潤，但無法完全消除哮喘小鼠的氣道炎癥。 2．哮喘小鼠SCF、M-CSF表達(dá)增多，SCF、M-CSF均參與了哮喘變應(yīng)性炎癥的形成。 3．BCG通過抑制M-CSF的表達(dá)，促使IL-12表達(dá)增多，發(fā)揮抗哮喘氣道炎癥的作用。 4．小鼠骨髓中SCF、M-CSF