西洋參莖葉皂苷對(duì)大鼠局灶性腦缺血損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：研究西洋參莖葉皂苷(PQS)對(duì)大鼠局灶性腦缺血損傷的保護(hù)作用及作用機(jī)制。 方法： 1.采用雄性Wistar大鼠,PQS 50、100 mg·kg-1ig,連續(xù)7d后利用線栓法建立大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞模型,造模后24h檢測(cè)下列指標(biāo)：(1)按Longa法進(jìn)行神經(jīng)癥狀評(píng)分,光鏡和電鏡觀察腦組織病理形態(tài)改變,TTC染色法測(cè)定腦梗死范圍；(2)比色法檢測(cè)患側(cè)腦組織LDH、SOD、NOS活性及LA、MDA、NO含量；(3)TUN

2、EL法和流式細(xì)胞儀檢測(cè)大腦皮質(zhì)細(xì)胞凋亡情況,RT-PCR技術(shù)及免疫組化法檢測(cè)大腦皮質(zhì)凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表達(dá)。 2.采用體外PC12細(xì)胞培養(yǎng),PQS終濃度為40、100、250μg·mL-1,以倒置相差顯微鏡、MTT法和比色法檢測(cè)缺糖缺氧、谷氨酸(Glu)、H2O2、NO損傷后PC12細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化、細(xì)胞活力和培養(yǎng)液中LDH活性,比色法檢測(cè)缺糖缺氧和Glu損傷后細(xì)胞內(nèi)SOD或NOS活

3、性、細(xì)胞內(nèi)MDA或培養(yǎng)液中NO含量；熒光分光光度法檢測(cè)應(yīng)用缺糖缺氧、Glu、高K+、鈣離子載體A23187及咖啡因等刺激因素后細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度([Ca2+]i)變化。 結(jié)果： 1.PQS能明顯改善局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)功能缺損體征,減少神經(jīng)功能缺損評(píng)分,縮小腦梗死范圍,減輕病理形態(tài)改變。 2.PQS能明顯升高局灶性腦缺血大鼠腦組織LDH和SOD活性,降低NOS活性及LA、MDA和NO含量。 3.PQS能明

4、顯降低局灶性腦缺血大鼠腦組織凋亡陽性細(xì)胞表達(dá)及細(xì)胞凋亡率,增加Bcl-2 mRNA和蛋白表達(dá),降低Bax和Caspase-3 mRNA及蛋白表達(dá),提高Bcl-2/Bax比值。 4.PQS能明顯增加缺糖缺氧、Glu、H2O2、NO損傷后PC12細(xì)胞活力,降低培養(yǎng)液中LDH活性,改善細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；增加缺糖缺氧損傷后SOD活性、降低MDA和NO含量；降低Glu損傷后NOS活性和NO含量。 5.PQS能明顯降低缺糖缺氧、Glu