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文檔簡介
1、目的:本研究旨在探討西洋參莖葉皂苷(PQS)對PC12細(xì)胞腦缺血損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。 方法:大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞((pheochromocytomacellline,PC12)是常用的神經(jīng)生物和神經(jīng)化學(xué)研究的細(xì)胞模型。本文以PC12細(xì)胞建立腦缺血五種損傷模型,利用MTT法檢測了PQS對缺血損傷的PC12細(xì)胞的保護(hù)效應(yīng);采用LDH法,檢測了PQS對細(xì)胞膜的影響。應(yīng)用生物化學(xué)方法,借助于紫外分光光度儀,觀察PQS對PC12細(xì)胞
2、擬缺糖缺氧損傷中抗氧化酶SOD(superoxidedismutase)、脂質(zhì)過氧化物MDA(malondialdehyde)和NO含量,GLU神經(jīng)毒損傷中NOS活性和NO含量的影響。應(yīng)用RT-PCR法和瓊脂糖凝膠電泳方法檢測PQS對PC12細(xì)胞擬缺糖缺氧損傷凋亡相關(guān)基因bcl-2、bax表達(dá)的影響。 結(jié)果:1.西洋參莖葉皂苷(PQS)對PC12細(xì)胞擬缺糖缺氧損傷具有明顯保護(hù)作用。表現(xiàn)為PQS可顯著提高細(xì)胞存活力和降低LDH活性
3、(p<0.01),以PQS100ug/mL保護(hù)最優(yōu)。顯著提高SOD活性和降低上清液中NO含量(p<0.01);PQS250ug/mL、PQS100ug/mL組能顯著降低MDA含量(p<0.01)。2.西洋參莖葉皂苷(PQS)對PC12細(xì)胞自由基、咖啡因、NO損傷模型均具有明顯保護(hù)作用。表現(xiàn)為PQS可顯著提高細(xì)胞存活力和降低LDH活性(p<0.01)。3.西洋參莖葉皂苷(PQS)對PC12細(xì)胞GLU神經(jīng)毒性損傷具有明顯保護(hù)作用。表現(xiàn)為PQ
4、S可顯著提高細(xì)胞存活力和降低LDH活性(p<0.01),顯著降低NOS活性和NO含量(p<0.01)。4.擬缺糖缺氧損傷后,PQS可上調(diào)bcl-2基因的表達(dá),下調(diào)bax基因的表達(dá)。 結(jié)論:(1)PQS對腦缺血損傷細(xì)胞具有明顯的保護(hù)活性,穩(wěn)定了膜結(jié)構(gòu),保護(hù)細(xì)胞免受損傷。(2)PQS可明顯提高SOD酶活性,降低MDA含量以及NOS酶活性和NO含量,表明PQS抗缺血保護(hù)機(jī)制是提高內(nèi)源性抗氧化酶活力,增加自由基清除,降低NOS活性而減少
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