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文檔簡介
1、目的:構建攜帶mTERT啟動子和m4-1BBL基因的重組腺病毒,為探討治療肝細胞肝癌的方法提供實驗基礎。觀察mTERT啟動子驅動的m4-1BBL基因對小鼠體內(nèi)腫瘤的生長的抑制作用,探討其治療潛力。 方法:應用細菌內(nèi)同源重組法構建重組腺病毒載體質粒pAd-mTERT-promoter-m4-1BBL,我們將得到的重組腺病毒載體質粒pAd-mTERT promoter-m4-1BBL經(jīng)脂質體轉染293A細胞,獲得重組腺病毒。同樣方法
2、得到空載體rAd病毒。我們用rAd-mTERT promoter-m4-1BBL、rAd感染小鼠肝癌細胞株Hepa1-6;用RT-PCR檢測轉染重組腺病毒后腫瘤細胞中m4-1BBL和mTERT promoter基因的表達情況。建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型。我們觀察8周,測定腫瘤的體積、重量、抑瘤效果。免疫組化檢測目的基因的表達情況。 結果:成功構建mTERT啟動子和m4-1BBL基因的重組腺病毒rAd- mTERT-pr
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