聾病的基因?qū)W研究.pdf

1、隨著人類基因組計(jì)劃的開展，帶動(dòng)著不同領(lǐng)域的研究人員為探索人類自身的奧秘而努力著。近年來，全球范圍內(nèi)的分子遺傳學(xué)家、生物學(xué)家與臨床聽力學(xué)家、耳鼻咽喉專科醫(yī)生們跨學(xué)科、跨領(lǐng)域地通力合作，以令人驚訝的速度破譯了多個(gè)聽覺基因。聽覺基因的發(fā)現(xiàn)為我們從分子水平揭示聽力及聽力下降的分子遺傳機(jī)制提供了令人振奮的機(jī)遇。目前有關(guān)人類聾病相關(guān)致病基因的研究工作主要包括兩個(gè)方面：一方面是定位克隆發(fā)現(xiàn)新的聾病基因，并對(duì)聾病基因的功能進(jìn)行鑒定研究；另一方面就是對(duì)于

2、已知的聾病基因在耳聾人群中進(jìn)行突變篩查和分子流行病學(xué)研究，來進(jìn)一步驗(yàn)證聾病基因與耳聾的相關(guān)性。我們正是基于上述的研究方向進(jìn)行本研究，研究包括兩方面的內(nèi)容：一方面在我國(guó)西北部地區(qū)部分語前聾患者中進(jìn)行已知GJB2基因突變檢測(cè)和分子流行病學(xué)研究；另一方面的研究是對(duì)解放軍總醫(yī)院耳鼻咽喉研究所擁有的兩個(gè)已經(jīng)定位的非綜合征型遺傳性耳聾大家系進(jìn)行候選基因的分析研究。 第一部分中國(guó)西北地區(qū)部分語前聾患者GJB2基因突變的分子流行病學(xué)研究本研究是

3、在中國(guó)西北地區(qū)的部分語前聾患者中進(jìn)行GJB2基因突變檢測(cè)和分子流行病學(xué)研究。研究對(duì)象是274名聾啞學(xué)生，均為非綜合征型耳聾，語前聾。GJB2基因突變檢測(cè)到了10種序列改變方式，包括2種多態(tài)性改變、7種文獻(xiàn)中已有報(bào)道的致病突變和一種新的序列改變方式。GJB2基因的突變率為71.9％，其中致病突變的攜帶率為20.8％，其中在與GJB2基因突變有關(guān)的聾啞人群中檢出致病突變GJB2_235delC占75.4％，是這些聾啞學(xué)生中最主要的致病突變形

4、式。通過本研究可以初步掌握GJB2基因在中國(guó)西北部語前聾人中的作用比例及主要的突變形式，為日后開展耳聾相關(guān)基因的篩查和臨床應(yīng)用提供前期參考，在聾病的早期診斷、遺傳咨詢等方面都具有重要的意義。 第二部分遺傳性耳聾家系候選基因的分析研究第二部分主要是在已經(jīng)通過連鎖分析法對(duì)兩個(gè)不同表型特征的中國(guó)耳聾大家系進(jìn)行了致病基因定位工作的前提下，進(jìn)行致病基因的分析研究。在這部分主要包括了對(duì)兩個(gè)遺傳性耳聾家系的致病基因的研究?jī)?nèi)容所構(gòu)成的兩個(gè)章節(jié)，

5、具體如下： 第一章：常染色體顯性遺傳低頻感音神經(jīng)性聽力下降家系致病基因定位區(qū)域內(nèi)WHRN基因分析研究本研究是在一個(gè)常染色體顯性遺傳、低頻聽力損失為主的遲發(fā)型感音神經(jīng)性聽力下降家系(F013家系)經(jīng)連鎖分析法進(jìn)行致病基因定位的基礎(chǔ)上，開展進(jìn)一步耳聾候選基因的分析研究。通過連鎖分析方法已經(jīng)將F013家系的致病基因定位在9號(hào)染色體上D9S16775-D9S1838之間，在D9S177處得到的LOD值為4.57(theta=0)，跨越4

6、6.47cM，物理距離28.54Mb。定位區(qū)域雖然與常染色體隱性遺傳的DFNB31和DFNB33基因組重疊，但與二者的表型不一致，是一個(gè)新的基因座位?？寺013家系耳聾致病基因時(shí)，我們首先考慮到定位區(qū)域內(nèi)已知的耳聾基因WHRN，它也是這個(gè)區(qū)域范圍內(nèi)目前僅有的一個(gè)已被克隆的基因。WHRN基因是DFNB31(表現(xiàn)為語前極重度聽力下降)的致病基因，盡管WHRN基因的耳聾表型與F013家系的完全不同，但有可能是WHRN基因不同突變位點(diǎn)而導(dǎo)致的

7、不同的表型，所以選擇了WHRN基因作為這個(gè)家系的候選基因進(jìn)行分析研究。共檢測(cè)到WHRN基因的序列改變方式有3種，均為雜合性突變，未與耳聾表型共分離，所以檢測(cè)到的這3種突變方式均為多態(tài)性改變。其中，在exon10上檢測(cè)到的2348T-C(V783A)突變?cè)谖墨I(xiàn)中已有報(bào)道。其他突變暫未見相關(guān)報(bào)道。 第二章：X連鎖隱性遺傳非綜合征型聽神經(jīng)病家系的候選基因GRIA3突變分析本研究是對(duì)我們課題組在國(guó)際上首次報(bào)道的一個(gè)X連鎖隱性遺傳非綜合征

8、型聽神經(jīng)病家系(Z015家系)進(jìn)行候選基因的分析研究。2004年我們課題組將Z015家系定位在Xq23-q27.3區(qū)域，遺傳標(biāo)記為DXS1220-DXS8084之間，在微衛(wèi)星標(biāo)記DXS1001、DXS1212和DXS1211處得到的最大LOD值2.33(theta=0.0)，跨越28.07Mb。在該區(qū)域內(nèi)沒有其它與耳聾相關(guān)的致病基因或致病基因座位，因此是一個(gè)新的耳聾基因座位，并在國(guó)際上首次命名為AUNX1。在定位區(qū)域內(nèi)，共有208個(gè)基因