14-3-3蛋白對(duì)神經(jīng)細(xì)胞分化的影響.pdf

1、為了研究14-3-3ε、γ在神經(jīng)細(xì)胞分化中的作用,我們用pEGFP-14-3-3ε、γ轉(zhuǎn)染PC12細(xì)胞,并以pEGFP空載體為對(duì)照.結(jié)果發(fā)現(xiàn),過(guò)表達(dá)pEGFP-14-3-3ε、γ的PC12細(xì)胞發(fā)生了明顯的分化,有神經(jīng)突起的生長(zhǎng).此外,我們將pEGFP、pEGFP-14-3-3ε在培養(yǎng)的大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中過(guò)表達(dá),結(jié)果發(fā)現(xiàn),過(guò)表達(dá)pEGFP的神經(jīng)干細(xì)胞仍然保持緊密成團(tuán)的狀態(tài),形成神經(jīng)干細(xì)胞球,形態(tài)沒(méi)有發(fā)生變化,而過(guò)表達(dá)pGFP-14-3-3ε

2、的神經(jīng)干細(xì)胞形態(tài)發(fā)生了顯著的分化,不僅細(xì)胞遷移,而且有明顯的神經(jīng)突起的生長(zhǎng).結(jié)果說(shuō)明,14-3-3ε、γ能夠促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的分化.然而,當(dāng)我們以pEGFP空載體為對(duì)照,將pEGFP-14-3-3 η在PC12細(xì)胞中過(guò)表達(dá)時(shí),發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)pEGFP-14-3-3 η的PC12細(xì)胞形態(tài)沒(méi)有發(fā)生明顯的分化.而用NGF處理PC12細(xì)胞后,過(guò)表達(dá)pEGFP-14-3-3 η的PC12細(xì)胞形態(tài)仍舊沒(méi)有發(fā)生明顯的分化,過(guò)表達(dá)pGFP的PC12細(xì)胞發(fā)生了分

3、化.結(jié)果說(shuō)明,14-3-3 η的過(guò)表達(dá)抑制PC12細(xì)胞的分化.我們進(jìn)一步研究了14-3-3蛋白家族成員ε、γ、τ和η四成員與Math2的相互作用對(duì)Math2介導(dǎo)的GAP-43啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄激活作用的影響.熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)結(jié)果表明,14-3-3ε、γ、τ分別與Math2共轉(zhuǎn)染P19細(xì)胞,它們與Math2的相互作用都進(jìn)一步增強(qiáng)了Math2介導(dǎo)的GAP-43啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄激活作用.而14-3-3 η對(duì)Math2介導(dǎo)的GAP-43基因啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄