Caveolin-1在人乳腺上皮細(xì)胞放射增敏中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、乳腺癌作為嚴(yán)重危害女性身心健康的疾病之一,受到人們的廣泛關(guān)注。眾所周知,放射治療在乳腺癌患者的局部控制中發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用。但在放療過(guò)程中,放射線在摧毀癌細(xì)胞的同時(shí)亦會(huì)波及一部分的正常組織細(xì)胞,使得正常細(xì)胞同樣受到射線的損傷。目前分子生物學(xué)技術(shù)——“基因聯(lián)合放射治療”的放療防護(hù)和放療增敏策略已在許多研究中得到認(rèn)可。
　　 窖蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)是胞膜窖(Caveolae)的重要結(jié)構(gòu)蛋白,參與細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交

2、換、各種特殊脂質(zhì)類(lèi)和脂調(diào)信號(hào)分子的濃縮和組裝以及參與多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。新近研究表明,Cav-1基因缺失會(huì)降低小鼠小腸隱窩干細(xì)胞電離放射后的恢復(fù)速度及存活能力；三維立體培養(yǎng)的胰腺癌細(xì)胞中,抑制Cav-1蛋白的表達(dá)導(dǎo)致電離放射后細(xì)胞DNA損傷程度加深,提示Cav-1可能參與放射后DNA損傷修復(fù)過(guò)程,影響著細(xì)胞的放射敏感性。
　　 本實(shí)驗(yàn)以Cav-1基因沉默的人乳腺上皮細(xì)胞株MCF10ACE和其母細(xì)胞株MCF10A為研究對(duì)象,觀察了X

3、射線放射后的細(xì)胞存活率、細(xì)胞周期的變化規(guī)律,及放射后DNA損傷修復(fù)因子及相關(guān)信號(hào)因子的表達(dá)變化。探討了Cav-1的表達(dá)水平與乳腺上皮細(xì)胞放射敏感性的關(guān)系及其影響DNA損傷修復(fù)的分子機(jī)制。旨在揭示Cav-1作為腫瘤抑制因子在放射損傷中的作用,并為尋找可能的放射防護(hù)分子靶標(biāo)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 結(jié)果如下:
　　 1.X射線放射后MCF10ACE細(xì)胞的存活率明顯低于對(duì)照組,細(xì)胞周期G1、G2期阻滯程度顯著高于對(duì)照組,細(xì)胞周期調(diào)

4、節(jié)蛋白cyclinD1和CDK4參與G1期阻滯；
　　 2.X射線放射后乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)Cav-1蛋白表達(dá)水平無(wú)顯著性變化,MCF10ACE細(xì)胞內(nèi)DNA損傷修復(fù)蛋白ATM、p53及應(yīng)激相關(guān)蛋白p38MAPK的激活程度低于對(duì)照組,且所形成的DNA斷裂點(diǎn)數(shù)目多于對(duì)照組；
　　 3.X射線放射后乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)Cav-1與Mdm2兩種蛋白有結(jié)合現(xiàn)象,放射后12h結(jié)合程度明顯高于放射后2h,且MCF10ACE細(xì)胞內(nèi)結(jié)合程度低于對(duì)照組