YM155在腫瘤細(xì)胞化療增敏中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、背景：
　　腫瘤是一種世界范圍內(nèi)均很常見(jiàn)的多發(fā)病，而惡性腫瘤則是目前對(duì)人類健康的危害表現(xiàn)最嚴(yán)重的一類疾病。我國(guó)最常為人所知和危害國(guó)人最嚴(yán)重的腫瘤有肺癌、乳腺癌、胃癌、肝癌、宮頸癌、白血病等，其中肺癌是最常見(jiàn)的、死亡率最高的腫瘤，而乳腺癌是中國(guó)女性所患最常見(jiàn)的惡性腫瘤。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein，IAP）家族成員survivin，其蛋白水平在阿霉素耐藥及高轉(zhuǎn)移性乳腺癌

2、細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)，提示 survivin在乳腺癌生存和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了重要作用。YM155，survivin靶向抑制劑，其能顯著下調(diào)乳腺癌細(xì)胞中 survivin的表達(dá)。因此，我們推測(cè) YM155可能通過(guò)抑制survivin來(lái)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，增加腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，在腫瘤細(xì)胞的生存及惡性腫瘤的治療中起到重要作用。
　　目的：
　　通過(guò)體外細(xì)胞學(xué)等實(shí)驗(yàn)檢測(cè)YM155對(duì)4種不同生物學(xué)特性的腫瘤細(xì)胞系（2種肺癌細(xì)胞及2種乳腺癌

3、細(xì)胞）的促凋亡作用，以及檢測(cè)YM155是否增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物紫杉醇（Paclitaxel，PAC）的敏感性，并闡述不同腫瘤細(xì)胞對(duì)YM155敏感性不同的可能原因及其機(jī)制。
　　方法：
　　1.采用體外實(shí)驗(yàn)如 MTT、克隆形成等實(shí)驗(yàn)檢測(cè) YM155及紫杉醇單獨(dú)或聯(lián)合使用時(shí)對(duì)4種腫瘤細(xì)胞的增殖所產(chǎn)生的影響；
　　2.采用體外實(shí)驗(yàn)如MTT、克隆形成、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度的YM155作用于4種腫瘤細(xì)胞時(shí)對(duì)其增

4、殖、凋亡、周期所產(chǎn)生的影響，并觀察4種腫瘤細(xì)胞對(duì) YM155敏感性是否不同；
　　3.采用體外實(shí)驗(yàn)如western blot，qRT-PCR等實(shí)驗(yàn)檢測(cè)P53，survivin，NF-κB通路等指標(biāo)的變化，分析YM155促凋亡及其敏感性差異的作用機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　1. YM155與化療藥物紫杉醇均抑制腫瘤細(xì)胞增殖誘導(dǎo)其凋亡，而YM155與紫杉醇聯(lián)合使用時(shí)所表現(xiàn)出的促進(jìn)凋亡作用明顯優(yōu)于單獨(dú)使用紫杉醇；
　　2.

5、 YM155對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用呈現(xiàn)濃度依賴性，隨著濃度的增加對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用也增加。并且p53狀態(tài)不同的腫瘤細(xì)胞對(duì)YM155的敏感性也不同，p53野生型的腫瘤細(xì)胞對(duì)YM155的敏感性要低于p53突變型或p53缺失型的腫瘤細(xì)胞；
　　3. P53狀態(tài)不同的腫瘤細(xì)胞對(duì)YM155所產(chǎn)生的誘導(dǎo)MDM2的作用并不相同。在低濃度YM155的刺激下，P53野生型腫瘤細(xì)胞中MDM2轉(zhuǎn)錄水平上升， YM155作為survivin的靶向抑制劑仍